高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Prostaglandin F2α methyl ester (1 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGF2α methyl ester; Prostaglandin F2α methyl ester
Dibutyryl-cGMP (sodium salt) (10 mg) Dibutyryl Guanosine 3’,5’-cyclic monophosphate; N-(1-oxobutyl)-cyclic 3’,5’-(hydrogen phosphate) 2’-butanoate guanosine, monosodium salt
三水FeNaEDTA(1KG) FeNaEDTA, 3H2O, 15708-41-5; MW 421.3
Suc-AAPF-pNA (100 mg) N-(3-carboxy-1-oxopropyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-nitnophenyl)-L-phenylalaninamide; Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitnoanilide; Suc-AAPF-pNA
7(Z),11(Z)-Nonacosadiene (1 mg) (7Z,11Z)-nonacosadiene; 7(Z),11(Z)-Nonacosadiene
N-[4-[(2R,4R,6S)-4-[[(4,5-Diphenyl-2-oxazolyl)thio]methyl]-6-[4-(hydroxymethyl)phenyl]-1,3-dioxan-2-yl]phenyl]-N’-hydroxyoctanediamide Tubacin
FFA Assay Buffer (40 ml) FFA Assay Buffer
*基化組蛋白H3K27多肽 Trimethyl Histone H3K27 Peptide (200 ul)
Tamoxifen (1 g) 2-[4-[(1Z)-1,2-diphenyl-1-buten-1-yl]phenoxy]-N,N-dimethyl-ethanamine; Tamoxifen
4-Fluorobuphedrone (hydrochloride) (5 mg) 4-FBP; 1-(4-fluorophenyl)-2-(methylamino)butan-1-one, monohydrochloride
LE 135 (5 mg) 4-(7,8,9,10-tetrahydro-5,7,7,10,10-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][1,4]diazepin-13-yl)-benzoic acid; LE 135
PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg) DHPI-3,4-P2|Phosphatidylinositol-3,4-bisphosphate C-6, PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Standard (1 ea) PGE2 EIA Express Standard; Prostaglandin E2 Express EIA Standard
6-Azidohexanoic Acid (100 mg) Click Tag
4-Fluororesorcinol 超級純 4-Fluororesorcinol Ultrapure Grade
(R)-Butaprost (50 mg) 9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; (R)-Butaprost
Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide (50 mg) N-(2-chloroetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2’-chloro-AEA; Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide
(S)-8-chloro-2-(pyrrolidin-2-yl)benzofuro[3,2-d]pyrimidin-4(3H)-one BMS-863233 xy7nochloride
PALCAMAgar
亞鹽瓊脂 Sulfite Agar 用于厭氧亞鹽還原桿菌的試管計數(shù)(SN標準)
真菌瓊脂培養(yǎng)基 Fungi Agar 250克 生物制品真菌無菌檢驗
MiddleBrook7H基礎(chǔ)250g/瓶用于分枝桿菌的分離培養(yǎng),每90ml培養(yǎng)基中添加0.5ml甘油(2和2ncubationmediaMiddleBrook7H基礎(chǔ)250g/瓶用于分枝桿菌的分離培養(yǎng),每90ml培養(yǎng)基中添加0.5ml甘油(2和2114
阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基
LecithinTween80NutrientAgar
假單胞分離瓊脂 250(g) incubation media 假單胞分離瓊脂 250(g)
快速硫化氫試驗瓊脂 H2S Test Medium 250克 彎曲桿菌的硫化氫試驗
亞利桑那菌瓊脂(SA)于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準)incubationmedia亞利桑那菌瓊脂(SA)于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準)
吲哚培養(yǎng)基(蛋白胨水) 10g 生化培養(yǎng)基,用于細菌靛基質(zhì)試驗,亦稱*肉湯(SN標準)
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)23090250g用于鑒別腸道菌尿素酶試驗
4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
TryptoseSoyaAgar
草酸鉀兔血漿0.2ml*20用于溶血性鏈球菌的檢驗
BF839菌計數(shù)選擇培養(yǎng)基 250g 用于脆弱擬桿菌BF839固體平板計數(shù)