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高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片

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高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。
高 GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片 產(chǎn)品詳情

 

GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
GC 革氏陽性細菌 PCR Mix 5100 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Prostaglandin F2α methyl ester 1 mg     9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGF2α methyl ester Prostaglandin F2α methyl ester

Dibutyryl-cGMP sodium salt 10 mg     Dibutyryl Guanosine 3,5-cyclic monophosphate; N-1-oxobutyl-cyclic 3,5-hydrogen phosphate 2-butanoate guanosine, monosodium salt

三水FeNaEDTA1KG     FeNaEDTA 3H2O, 15708-41-5; MW 421.3

Suc-AAPF-pNA 100 mg     N-3-carboxy-1-oxopropyl-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-4-nitnophenyl-L-phenylalaninamide; Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitnoanilide; Suc-AAPF-pNA

7Z),11Z-Nonacosadiene 1 mg     7Z11Z-nonacosadiene; 7Z),11Z-Nonacosadiene

N-[4-[2R4R,6S-4-[[45-Diphenyl-2-oxazolylthio]methyl]-6-[4-hydroxymethylphenyl]-1,3-dioxan-2-yl]phenyl]-N-hydroxyoctanediamide     Tubacin
FFA Assay Buffer 40 ml     FFA Assay Buffer

*基化組蛋白H3K27多肽     Trimethyl Histone H3K27 Peptide 200 ul

Tamoxifen 1 g     2-[4-[1Z-12-diphenyl-1-buten-1-yl]phenoxy]-N,N-dimethyl-ethanamine; Tamoxifen

4-Fluorobuphedrone hydrochloride 5 mg     4-FBP; 1-4-fluorophenyl-2-methylaminobutan-1-one, monohydrochloride

LE 135 5 mg     4-7,89,10-tetrahydro-57,7,1010-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][14]diazepin-13-yl-benzoic acid; LE 135

PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg)     DHPI-3,4-P2|Phosphatidylinositol-3,4-bisphosphate C-6, PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Standard 1 ea     PGE2 EIA Express Standard; Prostaglandin E2 Express EIA Standard

6-Azidohexanoic Acid 100 mg     Click Tag

4-Fluororesorcinol 超級純     4-Fluororesorcinol Ultrapure Grade

R-Butaprost 50 mg     9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; R-Butaprost

Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide 50 mg     N-2-chloroetxyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2-chloro-AEA Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide

S-8-chloro-2-pyrrolidin-2-ylbenzofuro[3,2-d]pyrimidin-43H-one     BMS-863233 xy7nochloride
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