真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F1α (100 ug) 9。alpha。,11。alpha。,15R,19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGF1α; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F1α
7-methyl Guanosine (50 mg) 7-
*(維生素H)(25GM) D-Biotin, 58-85-5; MW 244.31; Cell Culture Tested
Zoledronic Acid (hydrate) (50 mg) P,P’-[1-hydroxy-2-(1H-imidazol-1-yl)ethylidene]bis-phosphonic acid, monohydrate; Zoledronic Acid (hydrate)
8-methyl Nonanoic Acid (100 mg) 8-methyl Nonanoic Acid; Isocapric Acid; 8-methyl Nonanoic Acid
G3335; H-Trp-Glu-OH PPARγ Antagonist, G3335
FAAH (human recombinant) Assay Reagent (1 ea) FAAH (human recombinant); FAAH (human recombinant) Assay Reagent
*標記單甲基化組蛋白H3K27多肽 Biotinylated Monomethyl Histone H3K27 Peptide (100 ul)
DEPMPO-biotin (25 ug) N-[3-[[5-[(3aS,4S,6aR)-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[(2S,3R)-2-(diethoxyphosphinyl)-3,4-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin
Benzydamine (1 mg) N,N-dimethyl-3-[[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]oxy]-1-propanamine
HA-1100 (hydrochloride) (25 mg) 5-[(hexahydro-1H-1,4-diazepin-1-yl)sulfonyl]-1(2H)-isoquinolinone, monohydrochloride; Hydroxyfasudil; HA-1100 (hydrochloride)
Arachidonic Acid-biotin (5 mg) Arachidonic Acid-biotin, 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoyl-N’-biotinoyl-1,5-diaminopentane
384-Well Solid Plate (low volume; black) (5 ea) 384-Well Solid Plate (low volume; black)
BRD32048 (1 mg) N2-(4-metxoxypxenyl)-6-(1-piperidinylmetxyl)-1,3,5-triezine-2,4-diamine
yenine 5。5胺 [相當于Cy5。5胺] yenine 5。5 amine [equivalent to Cy5。5 amine]
Butaprost (free acid) (500 ug) 9-oxo-11。alpha。,16S-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid; 15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1|(±)-15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1; Butaprost (free acid)
Arachidonoyl Cyclopropylamide (10 mg) N-cyclopropyl-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA; Arachidonoyl Cyclopropylamide
4-(5H-Dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene)-1-[4-(2H-tetrazol-5-yl)butyl]-pipeni7ine AT 56
明膠磷酸鹽緩沖液250g用于檢測肉毒梭菌時樣品稀釋液
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎 Sodium lurite Broth Base 用于*的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
發(fā)酵蛋白胨 250
卵黃瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加2支2incubationmedia卵黃瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加2支21001
MethylRedVogesProskauerBroth
ISP培養(yǎng)基250g用于鏈霉菌的培養(yǎng)
BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時減少有害離子含量 454g incubation media BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時減少有害離子含量 454g
頂青霉 耐高溫* 支/瓶
亞鉍瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離
WORT瓊脂 250g 用于真菌,特別是酵母菌的計數(shù)和增菌培養(yǎng)
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次運輸BM液體培養(yǎng)基250g用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
50023 BR 10 kg incubation media 50023 BR 10 kg
構巢裸胞殼 支/瓶
LBBroth(Lennox)
DTM添加劑2 1ml*5 每支添加于200ml DTM培養(yǎng)基中