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培養(yǎng)植物蛋白酶抑制劑要用組織培養(yǎng)液。不同植物要求不同。養(yǎng)動物細胞也有區(qū)分。如果養(yǎng)哺乳動物細胞一般需要小牛血清和特定的培養(yǎng)基。而且也需要CO2培養(yǎng)箱等設(shè)施。養(yǎng)酵母的話,一般的酵母發(fā)酵液就可以了。
實驗室常用的細胞培養(yǎng)液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)液中一般有一個pH緩沖系統(tǒng),同時常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養(yǎng)液中一般需要加入一定量的血清。
培養(yǎng)液中的氨基酸除了13種細胞生長所必須的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促進細胞的生長。在必需的氨基酸中,L-*在溶液中不穩(wěn)定(在4℃培養(yǎng)溶液中半衰期為3個星期,37℃中為1個星期),需要在使用時加入。
葡萄糖在培養(yǎng)液中的含量一般為1g/L(低糖)或4.5g/L(高糖)。它是細胞代謝重要的能量來源。
細胞培養(yǎng)液中都有一個平衡鹽系統(tǒng),用于維持細胞的滲透壓、維持pH和細胞正常的代謝等。常用的平衡鹽系統(tǒng)有Dulbecco's phosphate buffered saline (D-PBS); Earle's balanced salts (EBSS) 和 Hanks' balanced salts (HBSS)。它們都含有蛋白酶抑制劑所必需的5種離子:鈉離子、鉀離子、鈣離子、鎂離子和磷酸根。培養(yǎng)液中的pH緩沖系統(tǒng)一般是*和HEPES等。
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