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古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片

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  • 更新時間2017-07-18
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古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片 產品詳情

 

古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Prostaglandin F2α 10 mg     9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α

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PtdIns--1,2-dipalmitoyl) -ammonium salt) (5 mg)     DPPI|Phosphatidylinositol C-16, PtdIns--1,2-dipalmitoyl) -ammonium salt), 1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol, monoammonium salt
Prostaglandin E2 Express AChE Tracer 100 dtn     PGE2 EIA Express Tracer; Prostaglandin E2 Express AChE Tracer

5-Azidopentanoic Acid 100 mg     5-Azidovaleric acid|Click Tag

yenine 5。5炔烴 [相當于Cy5。5炔烴]     yenine 55 alkyne [equivalent to Cy5。5 alkyne]

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Arachidonoyl Cyclopropylamide 50 mg     N-cyclopropyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA Arachidonoyl Cyclopropylamide

6-N-[2-[[4-2,4-dichloropxenyl-5-imidazol-1-ylpyrimidin-2-yl]amino]etxyl]-3-nitnopyridine-2,6-diamine; CT 98014     CHIR-98014
野生酵母培養(yǎng)基250g用于野生酵母計數(shù)培養(yǎng)

亞利桑那瓊脂(SA) 100(g) incubation media 亞利桑那瓊脂(SA) 100(g)

IMDM培養(yǎng)基 IMDM 10 BR

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