真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
Prostaglandin F2α (1 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α
Lofexidine (hydrochloride) (250 mg) 2-[1-(2,6-dichlorophenoxy)ethyl]-4,5-dihydro-1H-imidazole, monohydrochloride
活性炭(500GM) Charcoal, Activated & Acid Washed, 7440-44-0
Clenbuterol (hydrochloride) (10 mg) 4-amino-3,5-dichloro-α-[[(1,1-dimethylethyl)amino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol (hydrochloride)
8-methyl Nonanoic Acid (1 g) 8-methyl Nonanoic Acid; Isocapric Acid; 8-methyl Nonanoic Acid
N-(2,2,2-trichloro-1-(3-quinolin-8-lthioureido)ethyl)cinnamamide; SAL; eIF-2α Inhibitor Salubrinal
FFA Assay Cofactor 2 (1 ea) FFA Assay Cofactor 2
二甲基化組蛋白H3K27多肽 Dimethyl Histone H3K27 Peptide (100 ul)
DEPMPO-biotin (50 ug) N-[3-[[5-[(3aS,4S,6aR)-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[(2S,3R)-2-(diethoxyphosphinyl)-3,4-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin
Benzydamine (5 mg) N,N-dimethyl-3-[[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]oxy]-1-propanamine
Z-DEVD-FMK (1 mg) N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[(1S)-3-fluoro-1-(2-methoxy-2-oxoethyl)-2-oxopropyl]-L-valinamide, 1,2-dimethyl ester; Z-DEVD-FMK
5α-hydroxy-6-keto Cholesterol (50 mg) Cholestane-6-oxo-3β,5α-diol|6-Oxo-3,5-diol, 5α-hydroxy-6-keto Cholesterol, 3.beta.,5.alpha.-dihydroxy-cholestan-6-one
Human Plasma (500 dtn) Human Plasma
BRD32048 (500 ug) N2-(4-metxoxypxenyl)-6-(1-piperidinylmetxyl)-1,3,5-triezine-2,4-diamine
yenine 5。5疊氮化物 [相當(dāng)于Cy5。5疊氮化物] yenine 5。5 azide [equivalent to Cy5。5 azide]
Butaprost (free acid) (10 mg) 9-oxo-11。alpha。,16S-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid; 15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1|(±)-15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1; Butaprost (free acid)
Arachidonoyl Cyclopropylamide (5 mg) N-cyclopropyl-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA; Arachidonoyl Cyclopropylamide
4,4-Difluoro-8-(4-ethynylpxenyl)-1,3,5,7-tetrametxyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene BODIPY-Acetylene Reagent
ColumbiaMedium
亞利桑那菌瓊脂(SA) Salmonella Arizona Agar 用于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
小麥胚芽粉 Wheat gern powder 500克 BR
布氏瓊脂250g/瓶用于彎曲菌、布魯氏菌屬分離incubationmedia布氏瓊脂250g/瓶用于彎曲菌、布魯氏菌屬分離
EndoAgar
AgarmediumO(Baird-Parkeragar)
BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養(yǎng)基 incubation media BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養(yǎng)基
溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ)PotassiumluriteBloodAgarBase用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng)
雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于雙歧桿菌的分
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格氧化*胺培養(yǎng)基250g用于分解
50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑 incubation media 50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑
酮叢毛單胞菌 反硝化細(xì)菌 支/瓶
LBBroth(Miller)
YPDAMedium
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次價格變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合