真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運(yùn)輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Prostaglandin F2α (5 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α
Cefoxitin (sodium salt) (1 g) Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin; (6R,7S)-3-[[(aminocarbonyl)oxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[(2-thienylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt
四水肖鈣(500GM) Calcium nitnate, 4H2O, 13477-34-4; ≥99%; HAZARDOUS MATERIAL
Clenbuterol (hydrochloride) (25 mg) 4-amino-3,5-dichloro-α-[[(1,1-dimethylethyl)amino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol (hydrochloride)
7(Z)-Tricosene (10 mg) 7Z-tricosene; 7(Z)-Tricosene
Cathepsin G抑制劑 Cathepsin G Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde (1 g) [3aR-(3aa,4a,5b,6aa)]-5-(tert-butyl-dimethylsilyl)hexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; TBS-Corey Lactone Aldehyde
*標(biāo)記二甲基化組蛋白H3K27多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide (100 ul)
FTY720 phenoxy-biotin (100 ug) 2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane; FTY720 phenoxy-biotin
3,4-EDMA (hydrochloride) (5 mg) 3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-(2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride
Z-DEVD-FMK (500 ug) N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[(1S)-3-fluoro-1-(2-methoxy-2-oxoethyl)-2-oxopropyl]-L-valinamide, 1,2-dimethyl ester; Z-DEVD-FMK
PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt) (5 mg) DOPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-8, PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt), 1-(1,2-dioctanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, diammonium salt
Prostaglandin E2 Express AChE Tracer (500 dtn) PGE2 EIA Express Tracer; Prostaglandin E2 Express AChE Tracer
5-Azidopentanoic Acid (250 mg) 5-Azidovaleric acid|Click Tag
SunRed SE SunRed SE
(R)-Butaprost (1 mg) 9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; (R)-Butaprost
Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide (10 mg) N-(2-chloroetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2’-chloro-AEA; Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide
6-N-[2-[[4-(2,4-dichloropxenyl)-5-imidazol-1-ylpyrimidin-2-yl]amino]etxyl]-3-nitnopyridine-2,6-diamine; CT 98014 CHIR-98014
Fraser培養(yǎng)基250g用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
亞鐵瓊脂 Ferric Sulfite Agar 用于厭氧亞鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)
改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 Sabouraud′s Agar,Modified 250克 真菌檢測(cè)
22iddlebrookOADC增菌液20ml×20支/箱每支用于中incubationmedia22iddlebrookOADC增菌液20ml×20支/箱每支用于中
阪崎桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng),阪崎桿菌顯藍(lán)色,其它腸桿菌顯無色
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液250g用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)(低pH) Antibiotic Agar NO.2 用于四環(huán)素,*等效價(jià)測(cè)定
Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ) Honda Toxin-Producing Base 250克 致瀉大腸艾希氏產(chǎn)毒培養(yǎng)
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于*的增菌培養(yǎng)。每培養(yǎng)基需另加入鈉ncubationmedia亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于*的增菌培養(yǎng)。每培養(yǎng)基需另加入鈉1ml
動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次運(yùn)輸動(dòng)力—鹽培養(yǎng)基(A法)22270250g供鑒別測(cè)定細(xì)菌液化明膠用
4701-prf SM-prf 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4701-prf SM-prf 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
TryptoseSoyaAgar
MC培養(yǎng)基(不含瓊脂)250g用于嗜熱鏈球菌增菌培養(yǎng)
硫細(xì)菌培養(yǎng)基 250g 用于硫細(xì)菌的分離培養(yǎng)