即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次價(jià)格產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次價(jià)格變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次價(jià)格DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次價(jià)格使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
19(R)-hydroxy Prostaglandin E2 (50 ug) 9-oxo-11α,15S,19R-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGE2|19(R)-OH PGE2; 19(R)-hydroxy Prostaglandin E2
Prednisolone Phosphate (sodium salt) (5 g) Disodium Prednisolone 21-Phosphate; 11β,17-dihydroxy-21-(phosphonooxy)-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt
一水*(500GM) Sodium Phosphate, Monobasic, Monohydrate, USP Grade; 10049-21-5; Formula:NaH2PO4
NBQX (sodium salt) (50 mg) 1,2,3,4-tetrahydro-6-nitno-2,3-dioxo-benzo[f]inoneoxaline-7-sulfonamide, disodium salt; NBQX (sodium salt)
DAF-2 diacetate (100 ug) 2-(3,6-diacetyloxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein diacetate; DAF-2 diacetate
Phosphate Buffered Saline-Twen Tablets PBS-Tween Tablets
potewwium Phosphate Buffer (500 mM; pH 7。4) (5 ml) potewwium Phosphate Buffer (500 mM; pH 7。4)
SRT 1720 (50 mg) CAY10559|SIRT 1933; N-[2-[3-(1-piperazinylmethyl)imidazo[2,1-b]thiazol-6-yl]phenyl]-2-quinoxalinecarboxamide
Halopemide (10 mg) N-[2-[4-(5-chloro-2,3-dihydro-2-oxo-1H-benzimidazol-1-yl)-1-piperidinyl]-ethyl]-4-fluoro-benzamide; NSC 354856|R34301; Halopemide
Neutrophil Elastase Inhibitor (50 mg) 1-(3-methylbenzoyl)-1H-indazole-3-carbonitnile
JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5 (1 mg) (1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(4-methoxynaphthalen-1-yl)methanone; JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite-d5
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa
Linoleic Acid-d4 (1 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; Linoleic Acid-d4
AB-CHMINACA metabolite M6 (5 mg) 4-amino-3-(1-(cyclohexylmetxyl)-1H-indazole-3-carboxamido)-2-metxyl-4-oxobutanoic acid
iFluor 555 酰進(jìn) iFluor 555 hydrazide
CMPF-d5 (1 mg) 2-(2-carboxyetxyl)-4-metxyl-5-(propyl-2,2’,3,3,3-d5)furan-3-carboxylic acid; CMPF-d5
Adrenic Acid (100 mg) 7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenoic acid; Adrenic Acid
1- Isoliquiritigenin
TryptoseSoyaAgar
十六烷*基*瓊脂 250(g) incubation media 十六烷*基*瓊脂 250(g)
大腸菌群顯色培養(yǎng)基 10000ml 大腸菌群顯色培養(yǎng)基用于大腸菌群的快速檢測(cè)和計(jì)數(shù)
BCYE瓊脂(Legionella瓊脂)250用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)(OXOID方法)incubationmediaBCYE瓊脂(Legionella瓊脂)250用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)(OXOID方法)
ReinforcedClostridiumMedium
30%DextroseBroth
Todd-Hewitt 肉湯 250(g) incubation media Todd-Hewitt 肉湯 250(g)
BBE瓊脂 BBE Agar 250克 脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)
糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯250適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯250適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標(biāo)準(zhǔn))
SulfiteAgar,modified
即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次價(jià)格AgarmediumJ(Deoxycholatecitrateagar)
Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 抗生素瓊脂11號(hào) 1.05269.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 抗生素瓊脂11號(hào) 1.05269.0500 MERCK默克
半固體瓊脂 250g 供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4