培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97011 |
商品介紹:
名稱 肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源:肺靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細(xì)胞呈多邊形鵝卵石狀排列;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。 5.方法簡介: ()實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H004 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)
重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)
重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)
重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)
重組人 NRG4 蛋白
重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)
重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)
重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (Hi
肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Sarcoptidae ssp.疥螨通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Integrin β1/CD29 整合素β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Heterakis gallinarum雞異刺線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Sertad1 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Mass型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周FABPB 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
鮭魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周STK38 絲/蘇蛋白激38抗體 規(guī)格: 0.2ml
Haemonchus contortus捻轉(zhuǎn)血矛線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
Universal phytoplasma植原體PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周NPTX1 神經(jīng)細(xì)胞正五聚體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Fructus schisandrae chinensis五味子PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Human Papillomavirus 16(HPV-16)人瘤病毒16 LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周C19orf54 19號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1O)人免疫缺陷病毒1型O群探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Acetyl-Histone H3(K23) 乙?;M蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Poria茯苓探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周MAL T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml