培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96741 |
商品介紹：
名稱 RIN-m5F (大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞) 別稱RIN m5F; Rin-M-5F; Rin-m-5F; RINm-5F; RINm5F; RIN Cl-5F 組織來源胰腺/朗格漢斯胰島 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述RIN-m5F細(xì)胞是大鼠胰島細(xì)胞RIN-m的克隆，分泌胰島素及L型多巴脫羧酶；RIN-m5F細(xì)胞不產(chǎn)生生長激素抑制激素。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達(dá)情況insulin; L-dopa-decarboxylase |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽
RIN-m5F (大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)20次 Southern Marker Oligo（DIG） 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Serum amyloid P-component
500mL Blotto-Tween in TBS with azide Blotto-Tween in TBS with azide 常溫保存 15.6-1000 pg/mL 血栓素B2(Thromboxane B2)ELISA試劑盒
1瓶 QGY-7703株 QGY-7703 低溫運(yùn)輸和保存蛋白胨E進(jìn)口、國產(chǎn)Gelatin Peptone250克BR
250g D- D-Mannitol 室溫干燥保存 78-5000 pg/mL 人D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒
2 ug pIRES-puro pIRES-puro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D-aspartate oxidase
50次 柱式RNA純化試劑盒 Column RNAclean-Up 常溫保存,RNA洗脫液需要-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human 5-hydroxytryptamine receptor 1B
1mL 植物蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存 3.9-250 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein(a)
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（顆粒） 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein-arginine deiminase type-2
25g N-2- -N’-2- 乙基磺酸鈉 HEPES，Sodium Salt 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP5
150 U 限制性內(nèi)切NotI Restriction Endonuclease -20℃保存察氏培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)Czapek Dox Agar250克用于酵母菌的培養(yǎng)
2 ug pTALETF_v2 (NI) pTALETF_v2 (NI) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
