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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-19 21:39:47瀏覽次數(shù):238次

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貨號 BJ-01611378-2
糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:纖維母生長因子受體底物3抗體Phospho-p90RSK (Ser380) /FITC 熒光su標(biāo)記磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白抗體IgG
纖維連接蛋白抗體Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC 熒光su標(biāo)記磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白抗體IgG
CD56-PE20次小鼠肺癌低轉(zhuǎn)移(綠色熒光

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法

紫外分光光度法

50管/48樣

BJ-01611378-2

商品介紹:

測定意義:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進(jìn)行。

測定原理:

未添加激活劑時(shí),GPa催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

支架蛋白抗體陰溝腸桿菌吲達(dá)帕

非洲爪蟾IGC抗體枯草芽孢桿菌鹽suan妥洛特

干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體漢塔成對桿菌香櫞LAMP鑒定試劑盒

干擾suβ抗體紡錘狀鏈霉菌小鼠γ干擾su(IFN-γ)Elisa測定試劑盒

γ-干擾su/γ-IFN單克隆抗體稻平臍蠕孢大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa測定試劑盒

干擾su-γ/IFN-γ抗體貝酵母大鼠雙氫睪酮(DHT)Elisa測定試劑盒

干擾su-γ/IFN-γ抗體伯克霍爾德氏菌屬大鼠白介su2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)Elisa測定試劑盒

胰島su樣生長因子I受體抗體釀酒酵母白介su8抗體流式免疫組化

胰島su樣生長因子1受體抗體枯草芽孢桿菌蛋白mei激活受體-1抗體流式免疫組化

胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白2抗體厚孢根霉三甲狀腺suT3抗體流式免疫組化

胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白5抗體枯草芽孢桿菌多聚左旋賴ansuan

胰島su樣生長因子1抗體HymenobacterNa-苯甲酰-L-精ansuan乙酯鹽suan

胰島su樣生長因子-II抗體瑞士乳桿菌木瓜蛋白mei

白介su10抗體豇豆慢生根瘤菌鄰-α-D-吡喃葡萄糖苷

白介su13抗體釀酒酵母復(fù)合酶穩(wěn)定劑AES
糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法抗角蛋白(AKA)試劑盒 Anti-CHD1L Antibody蓬亂蛋白1

II型前膠原氨基端原肽(PIINP)試劑盒Anti-CHEK1 Antibody鳥苷三磷suan酶-發(fā)動(dòng)蛋白2

微管關(guān)聯(lián)蛋白(MAPτ)試劑盒Anti-CHML Antibody發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原

AMP活化蛋白激酶α1(PRKAα1)試劑盒Anti-CHID1 Antibody轉(zhuǎn)錄因子E2F-1

神經(jīng)肽Y受體Y1(NPYR1)試劑盒Anti-CHP1 Antibody轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗原

Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)試劑盒Anti-CHD4 Antibody轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗原

信號su7A(SEMA7A)試劑盒Anti-CHP2 Antibody轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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