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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-19 21:39:06瀏覽次數(shù):184次

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貨號(hào) BJ-01611378-1
糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:胞外分泌型絲氨/蘇氨蛋白激FAM20C抗體RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 熒光su標(biāo)記核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgG
8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC 熒光su標(biāo)記磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgG
血細(xì)胞亞群流式分析試劑專(zhuān)題

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611378-1

商品介紹:

測(cè)定意義:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開(kāi)α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無(wú)活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進(jìn)行。

測(cè)定原理:

未添加激活劑時(shí),GPa催化糖原和無(wú)機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)假單胞菌屬對(duì)羥基

干擾suα6抗體平菇新農(nóng)1號(hào)聚乙二4000

整合suβ2/Integrin β2抗體沙針草狀孢菌一縮二

抑制suA/Inhibin βA抗體灰紅鏈霉菌4-氨基苯乙酮

胰島su受體底物-3抗體茄拉爾氏菌苯并蒽酮

胰島su受體底物p53蛋白抗體膠質(zhì)芽孢桿菌*三苯基

胰島su受體底物-1抗體釀酒酵母硫suan銀

胰島su受體底物-2抗體紅法夫酵母*2-氨基噻唑

胰島su受體底物-4抗體布萊克威爾假絲酵母天麻su

白介su14抗體豬丹絲菌suan棗仁皂苷 B

腫瘤凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體枯草芽孢桿菌生姜油

Caspase激活的脫氧核糖核suan酶抑制劑抗體馬腸鏈球菌葒草苷

胰島su受體α抗體木蹄層孔菌23-乙酰澤瀉B

整合suα3β1抗體蘇云金芽孢桿菌黃柏酮

整合suβ7抗體弗雷德里克斯堡假單胞菌薄芝菌絲體粉
糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)試劑盒 Anti-CEP97 Antibody抑癌蛋白DKK1抗原

核孔蛋白37kda(NUP37)試劑盒Anti-CEP97 AntibodyDMBT1抑癌基因抗原

乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8 (MFG-E8)試劑盒 Anti-CERS4 AntibodyDNA依賴(lài)蛋白激酶催化亞基多肽抗原

游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 Anti-CES2 Antibody多能發(fā)育相關(guān)基因2抗原

微精蛋白β(MSMβ)試劑盒Anti-CGREF1 Antibody死亡受體4抗原

三肽基肽酶I(TPP1)試劑盒Anti-CHAF1A Antibody腫瘤調(diào)亡su/死亡受體5抗原

骨成型蛋白3(BMP-3)試劑盒 Anti-CHAF1B Antibody橋粒斑蛋白1抗原   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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