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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖異生系列>> 糖原合成酶(GCS)測(cè)試盒紫外分光光度法
貨號(hào) | BJ-01611377-2 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
糖原合成酶(GCS)測(cè)試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611377-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義: GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷鍵相連延長(zhǎng)糖鏈,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰島素作用的主要靶酶,對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。 測(cè)定原理: GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映GCS活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
FBXL11蛋白抗體猴頭菌激活的脫氧核糖核suan酶抗體流式免疫組化
免疫球蛋白超家族成員21抗體鐮刀菌半胱suan蛋白mei蛋白-13抗體流式免疫組化
白介su9抗體草suan青霉兔抗瓜ansuan環(huán)肽抗體流式免疫組化
乙酰乳suan合成酶蛋白抗體冠突曲霉CD17抗體流式免疫組化
異檸檬suan脫氫酶1抗體埃切假絲酵母抗L-瓜ansuan抗體流式免疫組化
IKK激酶相互作用蛋白抗體釀酒酵母食欲su受體抗體流式免疫組化
磷suan化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體乳菇屬鼠抗人前列腺特異性抗原抗體流式免疫組化
白介su8抗體泌液克里格范瑞吉酵母D-賴ansuan鹽suan鹽
Iroquois同源蛋白5抗體大櫻桃葉細(xì)菌性穿孔病*D-甲硫ansuan
整合suαE抗體Integrin αE頭狀絲孢酵母L-正纈ansuan
間粘附分子-2抗體膠孢鐮孢肌酐酶
整合suβ3抗體淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種S-腺苷高半胱ansuan水解酶
整合suα4抗體醬油曲霉環(huán)磷suan腺苷
白介su15抗體雜色曲霉甲基-β-環(huán)糊精
磷suan化白介su-1受體相關(guān)激酶1抗體豬丹絲菌苯甲suan酐
糖原合成酶(GCS)測(cè)試盒紫外分光光度法黑su瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)試劑盒 Anti-CEP55 Antibody防御suβ1抗原
型球蛋白A(sIgA)試劑盒 Anti-CEP78 Antibody防御suβ1抗原(人)
鈣視網(wǎng)膜蛋白(CR)試劑盒Anti-CEP95 Antibody防御suβ2抗原(小鼠)
血小板因子4變種1(PF4V1)試劑盒Anti-CEP95 Antibody防御suβ2抗原(大鼠)
天門(mén)冬ansuan氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 Anti-CEP76 Antibody凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原
XIII A1多肽(F13A1)試劑盒 Anti-CER1 Antibody鴨甲型肝炎A病抗原
促有絲分裂因子(MF/MPF)試劑盒 Anti-CERKL Antibody結(jié)蛋白抗原
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