當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖異生系列>> 葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法
貨號 | BJ-01611374-2 |
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優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01611374-2 |
商品介紹:
測定意義: 葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)廣泛存在于動物、植物、微生物和細(xì)胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證血糖的動態(tài)平衡方面起著重要的作用。 測定原理: G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NAD+還原生成NADH,在340nm下測定NADH生成速率,即可反映G6P活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白3抗體熒光假單胞菌六甲基磷酰三
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白5抗體基利恩帚枝霉1,5-萘二磺suan四水物
干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白2抗體異常威克漢姆酵母氯化鈰
干擾su誘導(dǎo)跨膜蛋白5抗體金針菇F8909植suan鈉
干擾sualpha/beta 受體1蛋白抗體枯草芽孢桿菌二乙基二硫代氨基甲suan鈉
干擾sugamma受體1蛋白抗體犁頭霉屬溴代十六烷
真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體枯草芽孢桿菌對甲苯磺suan乙酯
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白2抗體黑曲霉磷suan烯丙酮suan單環(huán)己銨鹽
干擾su誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1B抗體賴ansuan芽胞桿菌屬溴化亞銅
160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白抗體棉盤孢2-萘基硫脲
Bruton酪ansuan激酶抑制劑蛋白抗體蘋果黑腐皮殼丙ansuan
γ干擾su誘導(dǎo)蛋白IP30抗體米曲霉羥基積雪草苷
中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體擴(kuò)展青霉川續(xù)斷皂苷 Ⅵ (木通皂苷 D)
內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體金灰青霉十七碳suan甲酯
胰島su受體β抗體裂褐層孔菌柳穿魚葉苷
葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法G蛋白β1(GNβ1)試劑盒Anti-CDYL2 AntibodyMEK1/MAPKK1(N-端)
鈣調(diào)磷suan酶結(jié)合蛋白1(CABIN1)試劑盒 Anti-CEACAM21 Antibody促腎上腺皮質(zhì)釋放因子
Apelin 17(AP17)試劑盒 Anti-CEBP Delta Antibody衰老抑制基因抗原
蛋白激酶D1(PKD1)試劑盒Anti-CEBPD Antibody環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
谷ansuan脫羧酶2(GAD2)試劑盒Anti-CEBPD Antibody降鈣su抗原
色suP450家族成員1A2(CYP1A2)試劑盒 Anti-CEBPE AntibodyC端結(jié)合蛋白1抗原
神經(jīng)膠質(zhì)纖維suan性蛋白(GFAP)試劑盒Anti-CEBPE Antibody相關(guān)抗原4/性T抗原-4
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