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特異性RNA酶抑制劑的廣泛應(yīng)用2022/11/23
下面介紹３種廣泛應(yīng)用的特異性RNA酶抑制劑。1、RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑是從人胎盤分離的一種蛋白質(zhì)可與多種RNA酶緊密結(jié)合（KI≈3x1010）形成非共價結(jié)合的等摩爾復(fù)合物，使RNA酶失活。此蛋白質(zhì)體內(nèi)...
PCR反應(yīng)循環(huán)參數(shù)分析2022/11/14
PCR反應(yīng)循環(huán)次數(shù)，一般為25～30次。循環(huán)數(shù)決定PCR擴增的產(chǎn)量。模板初始濃度低，可增加循環(huán)數(shù)以便達到有效的擴增量。但循環(huán)數(shù)并不是可以無限增加的。一般循環(huán)數(shù)為30個左右，循環(huán)數(shù)超過30個以后，DNA...
HRP常見的底物2022/11/7
HRP底物范圍較廣，包括二氨基聯(lián)苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。一、二氨基聯(lián)苯胺／金屬鹽DAB是辣根過氧化物酶最敏感、常用的底物。它產(chǎn)生強烈的棕色產(chǎn)物，在水和醇中不溶解。多數(shù)情況下，推薦在DAB...
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作方法2022/10/31
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作方法：1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶...
ELISA實驗雙抗體夾心法操作步驟2022/10/24
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌...
解說PCR反應(yīng)中的主要成份引物2022/10/17
PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關(guān)鍵。引物設(shè)計和選擇目的DNA序列區(qū)域時可遵循下列原則：1、引物長度約為16-30bp，太短會降低退火溫度影響引物與模板配對，...
組織蛋白酶A抗體鑒定2022/10/10
組織蛋白酶A抗體鑒定：1、抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免...
免疫細胞分離技術(shù) ?2022/10/5
免疫細胞分離技術(shù)1、淋巴細胞的分離取肝素抗凝血1ml加Hanks液1：1稀釋后，沿管壁徐徐滴流疊加盛有2ml淋巴細胞分離液的試管內(nèi)（注意勿與分離液混合，然后2000r/min水平離心20min，管內(nèi)分...
今日快訊：菌種的培養(yǎng)2022/9/26
菌種的培養(yǎng)：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。2、挑選具有某種能...
PCR反應(yīng)溫度控制設(shè)置2022/9/19
在PCR自動熱循環(huán)中，關(guān)鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示，其變性、退火、延伸的條件是：94℃60s,37℃60s,72℃120s，共25～30個循環(huán)，擴增片段500bp。在這里，每一步的時間...
細菌在培養(yǎng)基上生長特性2022/9/13
細菌在培養(yǎng)基上生長特性:1．固體培養(yǎng)基標(biāo)本或液體培養(yǎng)物劃線接種到固體培養(yǎng)基表面后，單個細菌經(jīng)分裂繁殖可形成一個肉眼可見的細菌集團，稱為菌落（colony）。①菌落的形態(tài)特征：大小、形狀（露滴狀、圓形、...
新生牛血清的生產(chǎn)工藝2022/9/5
新生牛血清的生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：1、選取淺黃色、澄清且粘稠的原料血清，原料血清采集自出生14小時內(nèi)未進食的新生牛中，上述原料血清pH值為6.8～8.0，蛋白質(zhì)含量為3.5％～5.0％，細菌內(nèi)毒素低...
淺析qPCR反應(yīng)中的Ct值2022/8/30
閾值循環(huán)數(shù)Thresholdcycle(Ct)也寫作Cq值，熒光信號大于熒光閾值時PCR循環(huán)數(shù)。儀器軟件通常將第3-15個循環(huán)的熒光值設(shè)為基線（baseline），是由于測量的偶然誤差引起的。閾值（t...
ELISA實驗在洗滌過程中注意事項2022/8/22
ELISA在洗滌過程中需注意以下事項：1、板要平整，尤其是在用洗板機洗板的過程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有殘留，從而導(dǎo)致非特異性結(jié)合不能清除干凈，對實驗結(jié)果造成干擾。2、洗液溫...
PCR反應(yīng)引物的延伸2022/8/15
PCR反應(yīng)引物的延伸：DNA模板-引物復(fù)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條與模板DNA鏈互補的新鏈。引物延伸溫度的選擇取決于DN...
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