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初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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PCR反應(yīng)循環(huán)參數(shù)分析2022/11/14
PCR反應(yīng)循環(huán)次數(shù)，一般為25～30次。循環(huán)數(shù)決定PCR擴(kuò)增的產(chǎn)量。模板初始濃度低，可增加循環(huán)數(shù)以便達(dá)到有效的擴(kuò)增量。但循環(huán)數(shù)并不是可以無限增加的。一般循環(huán)數(shù)為30個(gè)左右，循環(huán)數(shù)超過30個(gè)以后，DNA...
HRP常見的底物2022/11/7
HRP底物范圍較廣，包括二氨基聯(lián)苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。一、二氨基聯(lián)苯胺／金屬鹽DAB是辣根過氧化物酶最敏感、常用的底物。它產(chǎn)生強(qiáng)烈的棕色產(chǎn)物，在水和醇中不溶解。多數(shù)情況下，推薦在DAB...
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作方法2022/10/31
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作方法：1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶...
ELISA實(shí)驗(yàn)雙抗體夾心法操作步驟2022/10/24
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌...
解說PCR反應(yīng)中的主要成份引物2022/10/17
PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性由一對(duì)上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關(guān)鍵。引物設(shè)計(jì)和選擇目的DNA序列區(qū)域時(shí)可遵循下列原則：1、引物長度約為16-30bp，太短會(huì)降低退火溫度影響引物與模板配對(duì)，...
組織蛋白酶A抗體鑒定2022/10/10
組織蛋白酶A抗體鑒定：1、抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免...
免疫細(xì)胞分離技術(shù) ?2022/10/5
免疫細(xì)胞分離技術(shù)1、淋巴細(xì)胞的分離取肝素抗凝血1ml加Hanks液1：1稀釋后，沿管壁徐徐滴流疊加盛有2ml淋巴細(xì)胞分離液的試管內(nèi)（注意勿與分離液混合，然后2000r/min水平離心20min，管內(nèi)分...
今日快訊：菌種的培養(yǎng)2022/9/26
菌種的培養(yǎng)：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。2、挑選具有某種能...
PCR反應(yīng)溫度控制設(shè)置2022/9/19
在PCR自動(dòng)熱循環(huán)中，關(guān)鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示，其變性、退火、延伸的條件是：94℃60s,37℃60s,72℃120s，共25～30個(gè)循環(huán)，擴(kuò)增片段500bp。在這里，每一步的時(shí)間...
細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長特性2022/9/13
細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長特性:1．固體培養(yǎng)基標(biāo)本或液體培養(yǎng)物劃線接種到固體培養(yǎng)基表面后，單個(gè)細(xì)菌經(jīng)分裂繁殖可形成一個(gè)肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落（colony）。①菌落的形態(tài)特征：大小、形狀（露滴狀、圓形、...
新生牛血清的生產(chǎn)工藝2022/9/5
新生牛血清的生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：1、選取淺黃色、澄清且粘稠的原料血清，原料血清采集自出生14小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛中，上述原料血清pH值為6.8～8.0，蛋白質(zhì)含量為3.5％～5.0％，細(xì)菌內(nèi)毒素低...
淺析qPCR反應(yīng)中的Ct值2022/8/30
閾值循環(huán)數(shù)Thresholdcycle(Ct)也寫作Cq值，熒光信號(hào)大于熒光閾值時(shí)PCR循環(huán)數(shù)。儀器軟件通常將第3-15個(gè)循環(huán)的熒光值設(shè)為基線（baseline），是由于測量的偶然誤差引起的。閾值（t...
ELISA實(shí)驗(yàn)在洗滌過程中注意事項(xiàng)2022/8/22
ELISA在洗滌過程中需注意以下事項(xiàng)：1、板要平整，尤其是在用洗板機(jī)洗板的過程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有殘留，從而導(dǎo)致非特異性結(jié)合不能清除干凈，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。2、洗液溫...
PCR反應(yīng)引物的延伸2022/8/15
PCR反應(yīng)引物的延伸：DNA模板-引物復(fù)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條與模板DNA鏈互補(bǔ)的新鏈。引物延伸溫度的選擇取決于DN...
抗球蛋白試驗(yàn)原理及應(yīng)用2022/8/8
抗球蛋白試驗(yàn)原理及應(yīng)用：利用抗球蛋白抗體作為第二抗體起橋聯(lián)作用，鏈接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，使紅細(xì)胞凝集，用于檢測抗紅細(xì)胞不*抗體。直接Coombs試驗(yàn)：新生兒溶血癥，自身免疫性溶血癥，特發(fā)性...
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