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RIPA Buffer配制2021/12/21
1.基礎(chǔ)成分Tris-HCl（緩沖液成分，防止蛋白變性）NaCl（鹽份，防止非特異蛋白聚集）NP-40（非離子去污劑，提取蛋白；用H2O配制成10%儲存液）去氧膽酸鈉（離子去污劑，提取蛋白；用H2O配...
血清細(xì)胞培養(yǎng)怎樣防止黑點產(chǎn)生2021/12/15
在血清的實驗中，血清細(xì)胞培養(yǎng)實驗的時候要怎樣防止黑點產(chǎn)品？首先這兩條需要注意：1、化凍：將血清從-20度冰箱中取出，室溫化凍。約需要30分鐘至2小時，也可放于4度冰箱化凍過夜；化凍后若不馬上滅活，可以...
細(xì)胞冷凍保存步驟及注意要點2021/12/9
細(xì)胞冷凍保存步驟：1.冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞生長情形。2.配制冷凍保存溶液(使用前配制)：將DMSO加入新鮮培養(yǎng)基中，最后濃度為5-10％，混合均勻，置于室溫下待用。3.按細(xì)胞傳代...
有關(guān)夾心ELISA檢測2021/11/29
檢測辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)是ELISA分析中使用*泛的兩種酶。要考慮到某些生物材料具有高水平的內(nèi)源酶活性（例如肺泡細(xì)胞中的高水平ALP、紅細(xì)胞中的高水平過氧化物酶），這可能會導(dǎo)...
選擇轉(zhuǎn)染試劑重要參考因素2021/11/24
研究人員可通過多種基因傳遞技術(shù)將質(zhì)粒DNA、sirna或者雙鏈RNAi、寡核苷酸和RNA轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞中，應(yīng)用于各種研究和藥物開發(fā)領(lǐng)域。下面介紹選擇轉(zhuǎn)染試劑重要參考因素：質(zhì)粒轉(zhuǎn)染：ThermoFishe...
使用血清時五個注意點2021/11/17
使用血清的時候，注意下列的操作:1、凍結(jié)血清時，請按照所主張的逐步凍結(jié)法(-20℃至4℃至室溫)，若血清凍結(jié)時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，試驗顯示十分簡單發(fā)生沉淀物。2、凍結(jié)血清時，請隨時將...
單抗制備融合后細(xì)胞不長或融合后克隆很少的原因2021/11/8
單抗制備為什么融合后細(xì)胞不長或者融合后克隆很少？可以從這幾個方面考慮：1、免疫用的動物品系不正確或者品系不純。免疫用的動物一般應(yīng)該與骨髓瘤來源的動物是相同品系，例如使用SP2/0骨髓瘤細(xì)胞時應(yīng)該選用B...
小鼠檢測試劑盒標(biāo)本收集及處理2021/11/3
小鼠檢測試劑盒標(biāo)本的采集與保存：1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4oC過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。...
一起了解抗原抗體那些事2021/10/26
抗原：引起人體產(chǎn)生抗體的物質(zhì)叫做抗原。（1）抗原（antigen，縮寫Ag）為任何可誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)。外來分子可經(jīng)過B細(xì)胞上免疫球蛋白的辨識或經(jīng)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的處理并與主要組織相容性復(fù)合體結(jié)合成復(fù)合物...
PCR技術(shù)三個基本反應(yīng)步驟2021/10/20
標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程分為三步：第一步，DNA變性（90℃-96℃）雙鏈DNA在高溫作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。第二步，退火（60℃-65℃）溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。第三步，延伸...
細(xì)胞培養(yǎng)一般條件2021/10/12
簡言之，即細(xì)胞需要什么就提供什么，道理是如此，真正能做到這點尚需時日，人們至今對細(xì)胞的生命周期控制機理認(rèn)識不足，癌細(xì)胞雖然也來自正常細(xì)胞，但至今不知道究竟為什么癌細(xì)胞很難停止已經(jīng)啟動的有害分裂，盡管如...
PCR出現(xiàn)非特異性擴增的原因與對策2021/10/8
PCR出現(xiàn)非特異性擴增：PCR擴增后出現(xiàn)的條帶與預(yù)計的大小不一致，或大或小，或者同時出現(xiàn)特異性擴增帶與非特異性擴增帶。（1）引物與靶序列不*互補或引物聚合形成二聚體。（2）Mg2+離子濃度過高。（3）...
細(xì)胞的傳代培養(yǎng)常見問題解答2021/9/27
細(xì)胞傳代：細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不斷增殖，培養(yǎng)皿/瓶空間有限，當(dāng)細(xì)胞接觸過密，生長就會受到抑制，影響細(xì)胞狀態(tài)，因此我們要把其中一部分細(xì)胞分到別的培養(yǎng)皿/瓶里。常見問題解答：Q：為什么我們總說選擇對數(shù)期細(xì)胞傳...
實驗室10項安全管理規(guī)則2021/9/24
實驗室10項安全管理規(guī)則：1、實驗室所有工作人嚴(yán)禁在實驗室飲食（吃東西）、儲存食品/飲料等個人生活物品；嚴(yán)禁做與實驗、研究無關(guān)的其他事情；2、所有實驗室區(qū)域嚴(yán)禁吸煙，包括室內(nèi)、走廊、電梯間等區(qū)域；3、...
穩(wěn)定細(xì)胞株篩選步驟方法2021/9/15
穩(wěn)定細(xì)胞株已廣泛應(yīng)用于重組蛋白、抗體生產(chǎn)、檢測分析、免疫治療藥物開發(fā)等研究領(lǐng)域。表達(dá)的蛋白/抗體穩(wěn)定性更好，批次間差異小，是生物醫(yī)藥研發(fā)的基礎(chǔ)。有時候，為了滿足細(xì)胞需求，我們會構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株而不是瞬時...
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