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回歸熱疏螺旋體PCR檢測試劑盒注意事項2020/07/09
回歸熱疏螺旋體PCR檢測試劑盒注意事項:1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。4.PCR試劑配制應(yīng)使用高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。6.試劑或樣品準(zhǔn)
猴組胺ELISA檢測試劑盒實驗注意事項2020/07/08
猴組胺ELISA檢測試劑盒實驗注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定
人Ⅲ型前膠原肽elisa檢測試劑盒實驗禁忌2020/07/07
人Ⅲ型前膠原肽elisa檢測試劑盒實驗禁忌:1、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。2、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其正確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,推薦使用排槍加樣。4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5、嚴(yán)格按照說明書的操縱進(jìn)行,ELISA試劑盒試驗結(jié)果判
TPO elisa酶聯(lián)免疫試劑盒檢測方法的局限性2020/07/01
TPOelisa酶聯(lián)免疫試劑盒檢測方法的局限性:①樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);②樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;③陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;④病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑤不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑥試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果樣本采集、存放及運(yùn)輸:1、費(fèi)用樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;2、存放:樣本在2~8℃條件下保存
豬纖維蛋白原elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法步驟2020/06/30
豬纖維蛋白原elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1
人神經(jīng)降壓素elisa檢測試劑盒實驗操作注意事項2020/06/24
人神經(jīng)降壓素elisa檢測試劑盒實驗操作注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍
田鼠痘病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素2020/06/23
田鼠痘病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素:1.引物與模板DNA特異正確的結(jié)合。2.堿基配對原則。3.TagDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性。4.靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及TagDNA聚合醇耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大増加加,被擴(kuò)増的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。靈敏度高PCR
黃熱病病毒疫苗株17PCR試劑盒實驗反應(yīng)五要素2020/06/18
黃熱病病毒疫苗株17PCR試劑盒實驗反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-
人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒用于檢測未知抗體的間接法2020/06/17
人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒用于檢測未知抗體的間接法:1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5
黃頭病毒PCR試劑盒注意事項2020/06/16
黃頭病毒PCR試劑盒注意事項:1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。4.PCR試劑配制應(yīng)使用高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都
牛雌二醇(E2)ELISA試劑盒注意事項2020/06/10
牛雌二醇(E2)ELISA試劑盒注意事項:1.當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。5.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
犬鳥嘌呤核苷酸交換因子1(GEF1)ELISA檢測試劑盒操作步驟2020/06/09
犬鳥嘌呤核苷酸交換因子1(GEF1)ELISA檢測試劑盒操作步驟1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加
猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3ELISA試劑盒操作步驟2020/06/04
猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒操作步驟:1,試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。2,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6,洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。8,嚴(yán)格按照說明
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒操作步驟2020/06/03
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒操作步驟:1,試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。2,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6,洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。8,嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子ELISA試劑盒注意事項2020/06/02
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒注意事項:1.當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。5.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
大鼠H+-K+-ATP酶(H+-K+-ATP)試劑盒樣本處理及要求2020/05/28
大鼠H+-K+-ATP酶(H+-K+-ATP)試劑盒樣本處理及要求:1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解
COX-2 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗檢測中樣品的處理方法2020/05/26
COX-2elisa酶聯(lián)免疫試劑盒檢測中樣品的處理:1.細(xì)胞培養(yǎng)物上清:細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫1000g,離心10分鐘后收集上清,并將標(biāo)本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.血清:標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。4.尿液:無菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測,要長
氣單胞菌通用PCR試劑盒的PCR反應(yīng)條件設(shè)置2020/05/21
氣單胞菌通用PCR試劑盒的PCR反應(yīng)條件設(shè)置:a)預(yù)變性:95℃,5min可以讓白細(xì)胞裂解,釋放可用于PCR擴(kuò)增的基因組DNA。請勿縮短時間或降低溫度。b)退火溫度:退火溫度設(shè)置為引物Tm值即可。然而,使用高的退火溫度可以有效減少非特異性擴(kuò)增,并提高全血模板的擴(kuò)增效率。因此,如擴(kuò)增產(chǎn)物特異性較差,可以建立一個溫度梯度反應(yīng)去尋找引物模板適退火溫度。c)延伸時間:按30sec/kb設(shè)定,如不足30sec,設(shè)置30sec即可。d)擴(kuò)增循環(huán)數(shù):35個循環(huán)已可以擴(kuò)增足量產(chǎn)物。太多的循環(huán)將會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增
溶血隱秘桿菌PCR檢測試劑盒引物與模板的正確結(jié)合2020/05/19
溶血隱秘桿菌PCR檢測試劑盒其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。(2)靈敏度高PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢
人腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒注意事項2020/05/14
人腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒注意事項:1.保存:試劑盒中各試劑請按說明書提示合理存放。在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,否則可能會出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。2.酶標(biāo)板:剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。暫時不用的板條應(yīng)拆卸后放入備用鋁箔袋,按推薦溫度存放!3.加樣:加樣或加試劑時,個孔與后一個孔的加樣時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。每次的加樣
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