應(yīng)用于食品和生物樣品中氨基酸的高靈敏度分析
氨基酸的分析不僅僅在食品工業(yè)中,同時在天然產(chǎn)物和醫(yī)藥領(lǐng)域也發(fā)揮著重要的作用。此柱后衍生熒光檢測系統(tǒng)利用鄰苯二甲醛(OPA)和N-乙酰半*作為反應(yīng)試劑,并且對具有復(fù)雜基質(zhì)樣品中的氨基酸進(jìn)行高選擇性、高靈敏度的定量分析。
特征
1、基于島津備受贊譽的柱后反應(yīng)技術(shù)和高靈敏度熒光檢測器高選擇性地檢測氨基酸。通過應(yīng)用衍生方法以及熒光檢測對氨基酸自由基進(jìn)行選擇性反應(yīng),其靈敏度比茚三酮法(UV檢測)要高出十倍以上。
2、杰出的重復(fù)性
由于經(jīng)色譜柱分離后再進(jìn)行衍生,反應(yīng)將不會受樣品基質(zhì)影響。因此,可實現(xiàn)高精度分析。
3、操作輕松
由于柱洗脫液通過與反應(yīng)試劑混合自動衍生,便可以節(jié)省時間和繁瑣的工作。
4、流動相和反應(yīng)試劑作為可選組件供應(yīng),意味著可以很輕松的準(zhǔn)備溶劑。
衍生反應(yīng)檢測流程
氨基酸首先經(jīng)陽離子交換色譜柱分離,然后由次氯酸鈉水溶液水解(將*等水解生成伯胺),將鄰苯二甲醛/ N-乙酰半*衍生試劑連續(xù)添加至柱洗脫液,然后由熒光檢測器進(jìn)行檢測。
分析案例
兩種型號可利用-鈉(NA)型,可快速對蛋白質(zhì)水解氨基酸進(jìn)行分析。另一個為鋰(LI)型,可分析天然存在的氨基酸。下圖中左圖是富含17種氨基酸的水解蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)色譜圖,由鈉(NA)型氨基酸分析系統(tǒng)檢測;右圖是醬油樣品分析色譜圖,醬油用pH2.2檸檬酸鋰緩沖溶液(樣品稀釋)稀釋200倍,并通過膜過濾器過濾。