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戴安液相色譜儀操作及原理

來(lái)源:賽默飛色譜及痕量元素分析   2024年11月29日 00:56  
戴安液相色譜儀是一種高效、精確的分離和分析化合物的設(shè)備,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析等領(lǐng)域。以下是戴安液相色譜儀的操作步驟及原理的詳細(xì)介紹:
 
 一、操作步驟
 
1. 操作前準(zhǔn)備
 
流動(dòng)相配制:根據(jù)所供試品的性質(zhì)、文獻(xiàn)資料或工作經(jīng)驗(yàn),按比例配制流動(dòng)相。并根據(jù)流動(dòng)相的性質(zhì)選擇合適的濾膜(如0.45um的有機(jī)膜或水相膜)對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾,然后進(jìn)行超聲脫氣10\~15分鐘。
樣品處理:稱(chēng)取或量取適量的對(duì)照品或供試品,用適當(dāng)?shù)娜軇ㄗ詈檬橇鲃?dòng)相或流動(dòng)相的主成分)進(jìn)行充分溶解,使其濃度達(dá)到0.1\~1mg/mL(可根據(jù)檢測(cè)結(jié)果再調(diào)節(jié)濃度)。并使用合適的濾膜(如0.45um的有機(jī)針頭濾膜或水相針頭濾膜)對(duì)樣品溶液進(jìn)行過(guò)濾。
色譜柱選擇:根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)纳V柱。
 
2. 開(kāi)機(jī)與儀器設(shè)置
 
打開(kāi)電源,啟動(dòng)電腦和液相色譜儀工作站軟件。
旋開(kāi)泵上的排液閥,設(shè)置流動(dòng)相的比例及流速,沖洗流路中的氣泡。
設(shè)置柱溫箱溫度,清洗進(jìn)樣器。
 
3. 樣品分析
 
建立儀器方法和處理方法(或調(diào)用已有的方法)。
打開(kāi)檢測(cè)器(如氘燈),設(shè)置波長(zhǎng)、采集頻率和時(shí)間常數(shù),監(jiān)視基線直至穩(wěn)定。
樣品通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣器注入色譜系統(tǒng),進(jìn)行分離和檢測(cè)。
樣品分析結(jié)束后,關(guān)閉檢測(cè)器,沖洗色譜柱,并依次關(guān)閉泵馬達(dá)、工作站、檢測(cè)器、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器等設(shè)備的電源。
 

 

 二、工作原理
 
戴安液相色譜儀的工作原理基于色譜技術(shù),具體來(lái)說(shuō):
 
 流動(dòng)相:攜帶樣品通過(guò)色譜柱的介質(zhì)。在泵的作用下,流動(dòng)相以穩(wěn)定的流速連續(xù)送入色譜柱系統(tǒng)。
 樣品進(jìn)樣:樣品溶液通過(guò)進(jìn)樣器注入色譜柱系統(tǒng)。進(jìn)樣器一般采用定量環(huán)或微量注射器,確保進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性。
 色譜柱分離:色譜柱是液相色譜儀的核心部件,由固定相和載體組成。樣品在流動(dòng)相的作用下通過(guò)色譜柱,不同組分在色譜柱中的吸附和洗脫能力不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
 檢測(cè)器檢測(cè):分離后的各組分依次進(jìn)入檢測(cè)器,檢測(cè)器根據(jù)各組分的性質(zhì)將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)進(jìn)行記錄。常見(jiàn)的檢測(cè)器有紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等。
 數(shù)據(jù)處理:液相色譜儀配備的數(shù)據(jù)采集和處理系統(tǒng)可以實(shí)時(shí)記錄各組分的峰形和峰高,并進(jìn)行積分和歸一化處理。通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的數(shù)據(jù),可以對(duì)組分進(jìn)行定性分析和定量計(jì)算。
 
 三、注意事項(xiàng)
 
 在操作過(guò)程中,要時(shí)刻注意防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完,避免空泵運(yùn)轉(zhuǎn)損壞儀器。
 流動(dòng)相應(yīng)先脫氣以避免產(chǎn)生氣泡影響流量穩(wěn)定性。
 溶劑泵的工作壓力不能超過(guò)規(guī)定的最高壓力。
 長(zhǎng)期不用時(shí)應(yīng)用甲醇沖洗各個(gè)通道并保持泵的清潔。
 色譜柱的保存和使用要遵循一定的規(guī)范以避免降低柱效或破壞固定相。
 
戴安液相色譜儀是一種功能強(qiáng)大且操作相對(duì)簡(jiǎn)便的分析設(shè)備。通過(guò)了解其操作步驟和工作原理以及注意事項(xiàng),可以更好地利用該設(shè)備進(jìn)行樣品分析和研究。

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