細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞

2.組織來源：冠狀動脈

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內(nèi)皮細胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R081

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

改良馬丁培養(yǎng)基 Martin Broth,Modified 250g 0.78-50 ng/mL 人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒

1瓶 BV2細胞株 BV2 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human BH3-interacting domain death agonist

100mL RNase-free SDS溶液,10%  常溫 78-5000 pg/mL 人分泌載體相關(guān)膜蛋白1(SCAM1)ELISA試劑盒

250U KOD DNA聚合 KOD D

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞醛類中和劑管（帶棉簽）  10ml*20

100g 氯化鋰 ( 無水 ) Lithium Chloride 室溫干燥保存

1nmol EcoR I-Not I-BamH I接頭 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors -20℃保存

plant lectin B4/IB4  植物凝集素IB4 0.2mlHLX1  同源異型盒基因HLX1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

GABPB2  核呼吸因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

TMIGD1  跨膜TMIGD1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Gold  膠體金標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.5ml

P53 protein(wt-p53)  瘤抑制基因P53蛋白抗體（野生型P53） 規(guī)格: 0.1mlCyclin G2  周期素G2抗體 規(guī)格: 0.1ml

CARD12  凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlARMC3 (Cancer/testis antigen 81)  瘤/睪抗原81抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-NMDAR2A (Tyr1325)  磷酸化受體2A抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml