我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞【Rat Coronary：Normal Coronary Artery Endothelial Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標(biāo)準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理：
1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo)，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當(dāng)細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)人顆粒溶素(granulysin)ELISA檢測試劑盒Humangranulysin 96T/48T 黑色素(水溶)  Nigrosine water soluble  質(zhì)量規(guī)格：BS

人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)ELISA檢測試劑盒HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2 96T/48T 黑色素(醇溶）  Nigrosin alcohol soluble  質(zhì)量規(guī)格：BS

人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa檢測試劑盒Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1 96T/48T 7-羥基;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準品）  7-Hydroxycoumarin  質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準品

人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA檢測試劑盒HumanSolubleAdenylateCyclase,sAC 96T/48T 氯化血紅素;血晶素  Hemin  質(zhì)量規(guī)格：0.98

人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA檢測試劑盒Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMC 96T/48T 5- 羧基熒光素二乙酸酯；5-CFDA  5-Carboxyfluorescein diacetate  質(zhì)量規(guī)格：0.95

人克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA檢測試劑盒HumanClaracellprotein,CC16 96T/48T 5(6)-羧基熒光素二乙酸酯  5(6)-Carboxyfluorescein diacetate  質(zhì)量規(guī)格：0.9

人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA檢測試劑盒HumanVacuolatingcytotoxinA,VacA 96T/48T 5-氨基熒光素  5-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格：>95%

人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA檢測試劑盒Humayrosinehydroxylase,TH 96T/48T 6-氨基熒光素  6-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格：0.95

人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA檢測試劑盒Humanmammaliaargetofrapamyein,mTOR 96T/48T 5(6)-氨基熒光素  5(6)-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格：0.9

人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA檢測試劑盒HumanleukocyteaigenA,HLA-A 96T/48T 5-FAM, SE；5-羧基熒光素琥珀酯  5-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester  質(zhì)量規(guī)格：0.9
人鈣蛋白酶抑制蛋白(T)試劑盒 Human T ELISA kit 鹽酸四環(huán)素  Tetracycline   質(zhì)量規(guī)格：Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade

RatIerleukin15,IL-15ELISAKit大鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸四環(huán)素(標(biāo)準品)  Tetracycline   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準品

PASE-6蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 /羧芐西林鈉  Carbenicillin di  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

MouseLysozyme,LZMELISA試劑盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羧芐西林鈉(標(biāo)準品)  Carbenicillin di  質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準品

小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒 ，英文名： FK ELISA Kit 芬苯達唑；苯硫咪唑  Fenbendazole  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測試劑盒MouseCoicosterone,COELISAKit 96T/48T 芬苯達唑；苯硫咪唑(標(biāo)準品)  Fenbendazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準品

人鈣蛋白酶抑素抗體(AT-DⅣ)試劑盒 Human AT-DⅣ ELISA Kit 氯前列醇鈉(D型）  D-Cloprostenol   質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

RatIerleukin16,IL-16ELISAKit大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 氯前列醇鈉(DL型）  DL-Cloprostenol   質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP34

PASE-6蛋白共沉淀分析試劑盒5 鹽酸川芎嗪(標(biāo)準品)  Ligustrazine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準品

MouseLysozyme,LZMELISA試劑盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸川芎嗪  Ligustrazine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞價格大鼠維生素K1(VK1)試劑盒 Rat Vitamin K1,VK1 ELISA Kit 氯化鈉（標(biāo)準品）   chloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

大鼠維受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)試劑盒 Rat Retinoic acid receptor responder protein 2,RARRES2 ELISA kit 氯化鈉   chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA檢測試劑盒RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit 96T/48T 氯化木蘭花堿（標(biāo)準品）  Escholine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準品

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA檢測試劑盒RatPepsinELISAKit 96T/48T 氯化木蘭花堿  Magnoflorine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準品

大鼠胃蛋白酶(PG)試劑盒 Rat Pepsin,PG ELISA Kit 四水  Manganese (II) chloride, tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠胃動素(MTL)ELISA檢測試劑盒RatMotilin,MTLELISAKit 96T/48T 氯化鎂六水(分子生物學(xué))  Magnesium chloride, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級

大鼠胃動素(MTL)試劑盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit 氯化鎂銨,氯化銨鎂,六水合氯化鎂銨  AMMoniuM MagnesiuM chloride  質(zhì)量規(guī)格：CP

大鼠胃動素受體(MTLR)試劑盒 Rat Motilin Receptor,MTLR ELISA Kit 氯化鎂  Magnesium chloride  質(zhì)量規(guī)格：工業(yè)級

大鼠胃泌素(Gasin)試劑盒 Rat Gasin ELISA Kit 氯化羅丹明110；羅丹明110  Rhodamine 110 chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%

大鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素試劑盒 Rat oxyomodulin ELISA Kit 氯化兩面針堿（標(biāo)準品）  Nitidine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準品
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。