公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠腸系膜平滑肌細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1402 |
商品介紹:
名稱 小鼠腸系膜平滑肌細胞 2.組織來源:腸系膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠腸系膜平滑肌細胞分離自腸系膜動脈組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側(cè),后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。腸動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。 5.方法簡介: ()實驗室分離的小鼠腸系膜平滑肌細胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的小鼠腸系膜平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M311 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳2-3代左右 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鹽四環(huán)素(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Tetracycline hydrochloride 小鼠角膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷;P 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ELISA Kit for Pig Insulin小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒,英文名:ADCYAP1 ELISA Kit
K1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,油狀 Vitamin K1 人狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
地膚子皂苷Ic 訂購|咨詢 規(guī)格: HPL
小鼠腸系膜平滑肌細胞TSA 瓊脂進口、國產(chǎn)TSA agar用于奶粉中坂崎桿菌的純化培養(yǎng)(FDA方法)250兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
胰蛋白胨大豆肉湯 進口、國產(chǎn)Trypticase (Tryptic) Soy Broth用于菌的MPN測定,增菌培養(yǎng),NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整(GB、SN標準)250兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒*直銷
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 進口、國產(chǎn)Baird-Parker Agar Base用于菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標準)250兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒進口、組裝
亞碲酸鹽卵黃增菌液 進口、國產(chǎn)Egg-Yolk Tellurite Emulsion加入Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中5ml*10兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒進口、分裝
兔血漿 進口、國產(chǎn)Rabbit Plasma用于菌凝固試驗0.5ml*20兔子骨膠原交聯(lián)/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
DNA瓊脂 進口、國產(chǎn)DNase Agar用于核糖核酸檢測100兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒*直銷
7.5%氯化鈉肉湯 進口、國產(chǎn)7.5% Sodium Chloride Broth用于菌的增菌培養(yǎng)(GB標準)250兔子骨堿性(BALP)免疫試劑盒進口、組裝
普通肉湯培養(yǎng)基 進口、國產(chǎn)Broth Medium用于菌的增菌培養(yǎng)(SN標準)250兔子甘肽還原(GR)免疫試劑盒進口、分裝
腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)用于菌腸毒素產(chǎn)毒試驗250兔子甘肽過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 進口、國產(chǎn)Sodium Tellurite Broth Base用于菌的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml250兔子甘肽(GSH)免疫試劑盒*直銷