商品介紹
測定意義 NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi)催化NADP+降解為NAD+的酶,與NADK一起調(diào)控NAD和NADP之間的平衡。 測定原理: NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無機(jī)磷的反應(yīng),通過測定無機(jī)磷的量來測定NADPase活性。 所需的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6351 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體Human EFHD2(EF-hand domain-containing protein D2) ELISA Kit快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂用于彎曲桿的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
陽離子通道相關(guān)蛋白β亞基抗體Human C9orf140(Protein C9orf140) ELISA KitMCP瓊脂用于產(chǎn)氣莢膜梭的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(Acumedia 方法)
特異性蛋白57抗體Human TNFRSF12A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A) ELISA Kit萘酮酸添加于200ml HB4160中制成LB2
L選擇素抗體Human TEC(Tyrosine-protein kinase Tec) ELISA KitL-胱鹽酸鹽
CD53抗體Human CDH6(Cadherin-6) ELISA Kit貝母素甲 Peimine
死亡同源蛋白6抗體Human MC5R(Melanocortin receptor 5) ELISA Kit多烯 Docetaxel
氯離子通道KB抗體Human MSH2(DNA mismatch repair protein Msh2) ELISA Kit還原輔Ⅰ抑制劑
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體Human ARC(Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ELISA Kit5-溴-4氯-3--β-D-半乳糖苷
NADP磷酸酶(NADPase)微量法檢測試劑盒草標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6%Anti-TNF-alpha/ TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體 IgG豬谷氨脫羧1(GAD1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
殺螟丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-TNF- Beta/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子-β抗體IgG豬絲裂原激活蛋白激激活蛋白激3 (MAPKAPK3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體IgG豬胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=3%Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體IgG豬B活化因子受體(BAFFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
莎稗 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Anti-TNFSF14/LIGHT/CD258/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體IgG豬低密度脂蛋白受體(LDLR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
乙草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95.5%Anti-TNFSF4/CD252/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體IgG豬突觸素(SYP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
乙草標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG豬T生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
乙草標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=3%Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體IgG豬白三烯E4(LTE4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三唑錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體IgG豬碳酐IX (CA9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
阿達(dá)唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95.5%Anti-CD34/Biotin 標(biāo)記CD34抗體IgG豬B分化因子(BCDF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
阿特拉津標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%Anti-TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體IgG豬內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制因子(VASPIN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
阿特拉津標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=7%Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體豬胎兒血紅蛋白(HBF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
阿特拉津 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-TP53/FITC 熒光素標(biāo)記抗腫瘤P53抗體IgG豬甘氨酰tRNA合成(GARS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雙脒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%Anti-t-PA/FITC 熒光素標(biāo)記組織型纖溶原激活劑抗體IgG豬抗利尿激素(ADH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雙脒標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%,體:Anti-TPH /FITC 熒光素標(biāo)記色氨羥化抗體IgG豬唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素2(SIGLEC2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒