胸腺上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：腦靜脈血管平滑肌細胞規(guī)格:5 × 105次方（1ml）
腦靜脈血管內(nèi)皮細胞規(guī)格:5 × 105次方（1ml）
腦動脈血管平滑肌細胞規(guī)格:5 × 105次方（1ml）
產(chǎn)品屬于：
產(chǎn)品名稱：胸腺上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格：5×105
貨號：FS-01X9879
產(chǎn)品類型：原代細胞
單位：T25/瓶
提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度（℃）：37
運輸溫度（℃）：常溫
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。 2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。 3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。 4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。 6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔子白介2(IL-2)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔一氧化氮(NO)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit nitric oxide,NO ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Substance P,SP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔子層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Laminin,LN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔環(huán)磷腺(cAMP)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit von Willebrand Factor,VWF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔骨橋(OPN)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔血清總補體(CH50)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
兔誘導型一氧化氮合成(iNOS)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
胸腺上皮細胞ANKRD11 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體規(guī)格: 0.2ml
ANKRD12 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體規(guī)格: 0.2ml
ANKRD13A 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體規(guī)格: 0.2ml
ANKRD9 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體規(guī)格: 0.2ml
APM2 脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體規(guī)格: 0.2ml
ANKS1A 錨蛋白重復及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體規(guī)格: 0.2ml
APOL3 載脂蛋白L3抗體規(guī)格: 0.2ml
ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 腫瘤/睪丸抗原81抗體規(guī)格: 0.2ml
