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細(xì)胞老化的征兆
1、細(xì)胞周期阻滯:
長(zhǎng)期的細(xì)胞周期阻滯是老化細(xì)胞的基本特征,也是體外鑒定細(xì)胞老化的指標(biāo)。為了檢查細(xì)胞是否躍出了細(xì)胞周期,人們通常檢測(cè)增殖指示分子Ki-67的表達(dá)豐度;或者通過(guò)將與胸腺嘧啶相似的溴脫氧尿mi 啶(Bromodeoxyuridine,BrdU)摻入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,觀察是否有新的DNA合成。細(xì)胞老化主要表現(xiàn)為G1期阻滯,個(gè)別情況下也可伴隨G2/M期周期阻滯,或直接由G2/M期阻滯誘發(fā)形成。
2、細(xì)胞形態(tài)改變:
雖然由于細(xì)胞周期的中斷和DNA復(fù)制的停止,老化細(xì)胞內(nèi)的DNA含量與正常細(xì)胞類(lèi)似,但 RNA與蛋白質(zhì)豐度均比正常細(xì)胞要明顯升高。這是因?yàn)?,盡管細(xì)胞進(jìn)入老化階段后蛋白質(zhì)的整體合成速率降低,但是蛋白質(zhì)的降解體系受到更加明顯的抑制,導(dǎo)致蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)持續(xù)堆積。但,由于不同組織來(lái)源的細(xì)胞,其形態(tài)本就各不相同,因此,目前還并無(wú)客觀的、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)從細(xì)胞形態(tài)判斷并定義老化細(xì)胞。換句話說(shuō),目前并不能直接根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)去判斷是否老化細(xì)胞。
無(wú)論是原代細(xì)胞或是細(xì)胞株,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞老化現(xiàn)象是存在且常見(jiàn)的,但卻容易被操作人員忽略,老化的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)的特征包括:細(xì)胞增殖變慢、細(xì)胞核體積異常及多核(4-8核)、表面分泌物增多、細(xì)胞體積增大、細(xì)胞扁平、細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡等現(xiàn)象。
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