培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97459 |
商品介紹:
名稱 小鼠胸腺上皮細(xì)胞 2.組織來源:胸腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 小鼠胸腺上皮細(xì)胞分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所,還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),根據(jù)其在胸腺中位置不同,可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識(shí)別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份,其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性,與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體,部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察,可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型。 5.方法簡(jiǎn)介: ()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): ()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M147 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人α半乳糖苷(αGAL)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒*直銷
人髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)免疫試劑盒*直銷
人李斯特菌抗體(IgM)免疫試劑盒*直銷
人肌酐(Cr)免疫試劑盒*直銷
人CD19分子(CD19)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
牛免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒*直銷
雞α酮戊二酸脫氫(α-KGDHC)免疫試劑盒*直銷
大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
倉鼠甘肽過氧化物3(GPX3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠胸腺上皮細(xì)胞Neisseria meningitidis Group C腦膜炎奈瑟C群探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周ADAMTSL3 整合素樣金屬蛋白與凝樣2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Medulla tetrapanacis通草LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Goat Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
騾源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周C10orf88 10號(hào)染色體開放閱讀框88抗體 規(guī)格: 0.2mlHE4 附睪分泌蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Feline Leukemia Virus(FeLV)貓白血病病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周TFF3 三葉肽因子3抗體 規(guī)格: 0.1mlLASS3 壽相關(guān)基因lASS3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Leptosphaeria lindquistii向日葵黑莖病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周EGFL8 表皮生因子樣蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlMAP3K14/NFkB Inducing Kinase NIK 絲裂原活化蛋白激3K14抗體 規(guī)格: 0.2ml
Arisaema cum bilePCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周VAV1 鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Mouse IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
Trichomonas stableri斯氏毛滴蟲LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周SMURF1 Smad蛋白E3泛素連接1抗體 規(guī)格: 0.2mlPSD93 突觸后密度蛋白93抗體 規(guī)格: 0.2ml
Influenza Virus A甲型流感()病毒H6亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周SMOC2 分泌模塊化鈣結(jié)合蛋白2抗體(平滑肌相關(guān)蛋白2) 規(guī)格: 0.2mlLAG-3/CD223 淋巴細(xì)胞活化基因-3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Radix aristolochiae青木香染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體) 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human sIgA/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.5ml
Leucocytozoon caulleryi卡氏住白 原蟲LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-ANTXR1(Tyr382) 磷酸化瘤管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體 規(guī)格: 0.1mlCNTD 細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml