參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：非凍型糞便保存液
產(chǎn)品貨號：YS-P013258
產(chǎn)品規(guī)格： 250mL
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
人分泌粒蛋白II (SCG2)去氧孕烯芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
人C-Myc結合蛋白(MYCBP)地索奈德 腫瘤抑制相關蛋白PHEMX抗體
人V-Myc骨髓瘤病癌基因同源物(MYC)甲磺酸加貝酯精神分裂癥與犰狳重復基因抗體
人C型凝集素結構域家族2成員C(CLEC2C) 甲磺酸加貝酯(標準品)乙脫氫酶1型抗體
人C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E) 地塞米松,氟美松磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
人乳酸脫氫酶C(LDHC) 地塞米松,氟美松（標準品）磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
人酪氨酸蛋白激酶受體A2(EphA2)鹽酸地爾硫卓磷酸化腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗體
人Dickkopf 相關蛋白2(DKK2) 鹽酸地爾硫卓(標準品)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
人DNA結合蛋白(DBP) 地美司鈉磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
人D-二聚體(D2D) 甲磺酸多拉司瓊磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH) 甲磺酸多拉司瓊(標準品)膜粘連蛋白6抗體
人凝血因子Ⅷ(F8) 鹽酸平錨蛋白重復結構域蛋白42抗體
人增殖相關蛋白2G4 (PA2G4)鹽酸多平（標準品）胞環(huán)蛋白肌動蛋白結合蛋白抗體
人Ⅰ型膠原α1(COL1α1) 鹽酸度洛西汀腺病5結合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關分子1)
人VI型膠原α3(COL6α3) 鹽酸度洛西汀(標準品)載脂蛋白A1抗體
人XIII型膠原 (COL13)度他雄自噬相關蛋白16A抗體
非凍型糞便保存液human C3 補體C3抗體山崳酸甲酯 85%
C5b-9 末端補體復合物抗體甘油單油酸酯 99%
CA125 卵巢癌抗原抗體無水溴化鎂 anhydrous, powder, 99.995%
CA15-3/MUC1 癌相關抗原抗體無水溴化鎂 98%
CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體戊酸甲酯 99%
CACNA1G/Cav3.1 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體戊酸甲酯 分析標準品, ≥99.8% (GC)
DFF-40beta/CAD/CPAN Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體甘露 ≥99.9999% metals basis
Casein 酪蛋白抗體甘露 分析標準品，>99.9999%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
