參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:植物專用蛋白酶抑制劑混合液,100X
產(chǎn)品貨號(hào):YS-P013265
產(chǎn)品規(guī)格: 1 mL
產(chǎn)品分類:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)鹽酸因(標(biāo)準(zhǔn)品)β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體
人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
人α肌動(dòng)蛋白(α Actin) 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
人α葡萄糖苷酶(α-Glu) 磷酸西他列汀一水二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體
人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH) 磷酸西他列汀一水(標(biāo)準(zhǔn)品)腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
人α乳清蛋白(α-La)壯觀霉素,鹽酸大觀霉素紅蛋白Ank1抗體
人突觸核蛋白α(SNCα) 壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
人血小板衍生生長因子受體β(PDGFRβ)鹽酸坦洛新/鹽酸坦索羅辛α1B糖蛋白抗體
人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)紅霉酮(特利霉素)載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
人II型前膠原羧基端原肽(PIICP)替米沙坦凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)替米沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體
人原鈣黏素γA2(PCDHγA2) (標(biāo)準(zhǔn)品)酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
人半乳糖苷酶β(GLβ)噻托溴銨一水合物腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
人甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1) 鹽酸酮肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體
人β-促脂素(β-LPH) 鹽酸酮(標(biāo)準(zhǔn)品)ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
植物專用蛋白酶抑制劑混合液,100XPhospho-Beta-Catenin (Ser552) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體乙酸對(duì)酯 99%
Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體1-亞硝基吡咯烷 99%
Phospho-Beta-Catenin (Thr41/Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%
Cateninma gamma gamma連環(huán)蛋白抗體對(duì)壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,異構(gòu)體混合物
Cathepsin B 組織蛋白酶B抗體β-萘標(biāo)準(zhǔn)溶液 分析標(biāo)準(zhǔn)品,10 ng/μl
DPP-I 組織蛋白酶C抗體β-萘 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Cathepsin E 組織蛋白酶E抗體1-萘磷酸 99%
Cathepsin D 組織蛋白酶D抗體煙堿 異構(gòu)體總量:99%(劇品)