我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

大鼠表皮黑色素細胞【Rat Skin: Normal Melanocytes】產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAP 96T/48T Z-Ala-Ala-Leu-pNA  Z-Ala-Ala-Leu-pNA  質量規(guī)格：>95%,BR

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒 ，英文名： PAP ELISA Kit 三亞碳酸酯  TMC   質量規(guī)格： 度≥99%

小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit 碳酸錳(>98%,BR)  Manganese (II) carbonate  質量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 二氫錳(>98%,BR)  Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate  質量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor,PAI 96T/48T 松三糖單水；D-(+)-松三糖一水  Melezitose monohydrate  質量規(guī)格：>99%,BC

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1 96T/48T 縮節(jié)胺(植物激素級)  Mepiquat chloride  質量規(guī)格：>97%,植物激素級

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI1 ELISA Kit 偏(>38%(HPO3),BR)  Metaphosphoric acid  質量規(guī)格：>38%(HPO3),BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit 肉桂酸甲酯(>98%,BR)  Methyl cinnamate  質量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI2 ELISA Kit 二氫酮酸甲酯(植物激素級)  Methyl dihydrojasmonate  質量規(guī)格：>90%,植物激素級

小鼠纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒 ，英文名： TAFI ELISA Kit 吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)  Methyl indole-4-carboxylate  質量規(guī)格：>98%，BR
COLLAGENI蛋白共沉淀分析試劑盒5 醋酸鎂四水(分子生物學級)  Magnesium acetate, tetrahydrate  質量規(guī)格：>99%,分子生物學級

MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙?；?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二氫鈉一水(ACS級)   phosphate, monobasic, monohydrate  質量規(guī)格：ACS級,>98.5%

小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)ELISA試劑盒 ，英文名： F8aLC ELISA Kit 葡萄糖酸鈣  Calcium gluconate, hydrate  質量規(guī)格：>99%

小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測試劑盒Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T 十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?；溠刻擒?/span>  N-Dodecyl-b-maltoside  質量規(guī)格：>99%,分子生物學級

人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 Human LRP ELISA Kit 鹽酸氨基脲  Aminourea   質量規(guī)格：>98%,BR

Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫酸鏈霉素滅菌溶液，30 mg/ml  Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml  質量規(guī)格：Sterile滅菌溶液,30mg/ml

Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20 乙酰胺  Acetamide  質量規(guī)格：>98%

MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 萘乙酰胺(AR)  1-Naphthylacetamide  質量規(guī)格：AR,>98%

小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅫ ELISA Kit 鐵屑(>98%，BC)  Iron granules  質量規(guī)格：>98%，BC

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA檢測試劑盒Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 96T/48T 檸檬酸鐵(>98%，BR)  Iron(III)   質量規(guī)格：>98%，BR
大鼠表皮黑色素細胞價格動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20 三戊酯(>98.0%(GC))  Triamyl Phosphate  質量規(guī)格：>98.0%(GC)

動物腦組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀三水(>98%,BC)  Potassium phosphate, tribasic trihydrate  質量規(guī)格：>98%,BC

動物內皮細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀  Potassium phosphate, tribasic  質量規(guī)格：>98%

動物皮膚組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 酯(標準品)  Trimethyl phosphate  質量規(guī)格：分析標準品

動物脾臟組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鈣(>98%,BR)  Calcium phosphate, tribasic  質量規(guī)格：>98%,BR

動物前列腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三丁酯(標準品)  Tributyl phosphate  質量規(guī)格：分析標準品

動物全血高質化線粒體分離試劑盒10 三丁酯(standard for GC,>99.5%)  Tributyl phosphate  質量規(guī)格：standard for GC,>99.5%

動物全血活性線粒體分離試劑盒10 三丁酯(CP)  Tributyl phosphate  質量規(guī)格：CP

動物全血線粒體粗提分離試劑盒10 三丁酯(AR,99%)  Tributyl phosphate  質量規(guī)格：AR,99%

動物全組織糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒10 三苯酯(標準品)  Triphenyl phosphate  質量規(guī)格：分析標準品,≥99.8%(GC)
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。