注意事項:
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963922 |
大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞【Rat Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 ,英文名: TARC ELISA Kit 鉀一水(>98%,BR) Potassium tartrate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA試劑盒 ,英文名: TP ELISA Kit 亞碲酸鉀(>98%,BR) Potassium tellurite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠胸腺旁腺素(PTMS)ELISA試劑盒 ,英文名: PTMS ELISA Kit 四草酸鉀二水(>99%,BR) Potassium tetraoxalate dehydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠雄(ASD)ELISA試劑盒 ,英文名: ASD ELISA Kit 硫代硫酸鉀(>98%,BR) Potassium thiosulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠雄激素(androgen)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 草酸鈦鉀二水(>98%,BC) Potassium titanyl oxalate ,dehydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
小鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit 對苯二甲醛(>98%,BR) p-Phthaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠嗅素4(OLFM4)ELISA試劑盒 ,英文名: OLFM4 ELISA Kit 丙基紅(>80%,Ind Grade) Propyl red 質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind Grade
小鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 吡唑(>98%,BR) Pyrazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA檢測試劑盒MouseBromodeoxyuridine,BrdU 96T/48T 焦(>45%,BR) Pyrophosphoric acid 質(zhì)量規(guī)格:>45%,BR
小鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒 ,英文名: BrdU ELISA Kit 奎寧(>98%,BC) Quinine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)試劑盒 Rat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit 原釩酸鈉 orthovanadate 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR
英文名稱HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配體(Flt-3ligand)規(guī)格:96T/48T 草酰乙酸 Oxaloacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
動物組織細(xì)胞色素P450酶體系濃度定量檢測試劑盒20 硫酸鋅七水(AR) Zinc sulfate, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
ELISAKitPY兔交聯(lián)物規(guī)格:48T/96T 鉀鈉四水 Potassium tatrate, tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒 ,英文名: Coisol ELISA Kit 縮二脲 Biuret 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA檢測試劑盒MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 96T/48T 硫酸鎂無水(分子生物學(xué)級) Magnesium sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
人肺炎衣原體抗原(Cpn)試劑盒 Human chlamydia pneumoniae,Cpn ELISA Kit 石英砂 Quartz sand 質(zhì)量規(guī)格:BR
RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 3-氨基-1,2,4-三唑 3-AT 質(zhì)量規(guī)格:>96%,分子生物學(xué)級
CLEAR&PURE潔手露10毫升/瓶 鈉十二水 phosphate, tribasic, dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
Mousemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 無水氫二鈉(分子生物學(xué)級) phosphate, dibasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞價格蛋白雜交封閉溶液100毫升 硫黃素 T(>75%,BS) Thioflavin T 質(zhì)量規(guī)格:>75%,BS
蛋白雜交封閉溶液100毫升 硫化鋅(>98%, Ind Grade) Zinc sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98%, Ind Grade
蛋白雜交封閉溶液100毫升 硫化鐵 (II)(>70%,BR) Iron (II) sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BR
蛋白巰基化(S-thiolation)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 硫靛紅 Thioindigo 質(zhì)量規(guī)格:
蛋白巰基化(S-thiolation)同位素法分析試劑盒20 硫丹醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Endosulfan alcohol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
蛋白體復(fù)合物制備試劑盒20 硫代乙酰胺 Thioacetamide 質(zhì)量規(guī)格:AR, ≥99.0%
蛋白硝基化染色測定試劑盒10 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸鈉鹽 Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
蛋白樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 Thionicotinamide adenine dinucleotide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
蛋白樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20 硫代甜菜堿 8 Sulfobetaine 8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝
蛋白樣品多粘菌素層析法去內(nèi)試劑盒20 硫代甜菜堿 12 Sulfobetaine 12,SDDAB 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR