我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷(xiāo) | T25m2 | CS-963809 |
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Mouse Coronary:Normal Coronary Artery Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶(hù)接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
大鼠胰淀粉酶α2A(AMY2A)試劑盒 Rat Pancreatic alpha-amylase,AMY2A ELISA kit 芹菜素(標(biāo)準(zhǔn)品) Apigenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAmylin 96T/48T 齊墩果酸 Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR
大鼠胰淀素(Amylin)試劑盒 Rat Amylin ELISA Kit 齊墩果酸(高98%) Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
大鼠胰多肽 試劑盒 Rat Pancreatic prohormone,PPY ELISA kit 齊墩果酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Oleanolic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰高血糖素(GC)試劑盒 Rat Glucagon,GC ELISA Kit 莽草酸 Shikimic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)試劑盒 Rat glucagon-like peptide-1,GLP-1 ELISA Kit 莽草酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Shikimic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰高血糖素樣肽2(Glp-2)試劑盒 Rat glucagon-like peptide-2,GLP-2 ELISA Kit 利奧西呱,BAY 63-2521 Riociguat 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可溶性鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激 (sGC)活劑
大鼠胰脂肪酶(PL)試劑盒 Rat Pancreatic Lipase,PL ELISA Kit 馬來(lái)酸非尼拉敏 Pheniramine Maleate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)試劑盒 Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit DANSYL-GCVLS FTase Substrate, Fluorogenic 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
大鼠乙脫氫酶(ALDH)試劑盒 Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit 利那洛肽 Linaclotide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)分析體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 布南色林 Blonanserin 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠酸性0酸酶1(ACP1)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP1 ELISA Kit 夫定 Brivudine 質(zhì)量規(guī)格:度≥99.0%,含量≥98.5%
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T 夫定(標(biāo)準(zhǔn)品) Brivudine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)試劑盒 Bovine Caveolin-1,CAV1 ELISA kit 卡巴他賽 Cabazitaxel 質(zhì)量規(guī)格:≥99%
英文名稱(chēng)HumanBonemorphogeneticprotein6ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)6(BMP-6)規(guī)格:96T/48T 米托蒽醌 Mitoxantrone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
動(dòng)物細(xì)胞/組織0酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconatedehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒5 拉莫三嗪 Lamotrigine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑盒大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品) Lamotrigine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP ELISA Kit D-半乳糖醛酸 D-Galacturonic acid 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,97%,一水
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA檢測(cè)試劑盒MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAkit 96T/48T D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Galacturonic acid 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定;一水物
人谷氨酸受體(NMDAR)試劑盒 Human glamate receptor,NMDAR ELISA Kit 骨化三醇 Calcitriol 質(zhì)量規(guī)格:度≥98%,BR
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷(xiāo)茶葉維生素U(S-Methylmine)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 普伐他丁鈉 Pravastatin 質(zhì)量規(guī)格:>98%
差異相減雜交試劑盒10 蒲公英甾醇乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) taraxasteryl acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
產(chǎn)氣莢膜梭菌α(Closidiumperfringenscpa)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 蒲公英甾醇乙酸酯 HPLC≥98% 10mg
產(chǎn)氣莢膜梭菌腸(Closidiumperfringenscpe)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 蒲公英甾醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Taraxasterol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EerotoxigenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 蒲公英甾醇 HPLC≥98% 20mg
腸出血性大腸埃希菌(EerohaemorrhagicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 蒲公英萜醇;蒲公英賽醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Taraxerol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
腸桿菌EE營(yíng)養(yǎng)肉湯500毫升 蒲公英賽酮 HPLC≥98% 5mg
腸集聚型大腸埃希菌(EeroaggregativeE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 蒲公英賽醇 HPLC≥98% 20mg
腸侵襲性大腸桿菌(EeroinvasiveE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 葡萄糖氧化酶 Glucose oxidase 質(zhì)量規(guī)格:BR,>200U/mg
腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒50 葡萄糖酸鋅(標(biāo)準(zhǔn)品) Zinc gluconate 質(zhì)量規(guī)格:檢查