細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞直銷 | T25m2 | CS-963789 |
小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞【Mouse Airway: Normal Bronchial and Tracheal Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基松香酸 HPLC≥98% 5mg
MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISA試劑盒小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基,,,四甲氧基山山酮 HPLC≥98% 10mg
Mousecarcinoembryonicaign,CEAELISA試劑盒小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氧乙酰旋覆花內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg
MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,,,'四羥基二苯乙烯葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
Mousecardioophln1,CT-1ELISA試劑盒小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ”O沒食子酰基金絲桃苷 HPLC≥98% 20mg
Mousecatecholamine,CAELISA試劑盒小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)人參皂苷Rg HPLC≥98% 20mg
MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA試劑盒小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)原人參三醇 HPLC≥98% 20mg
Mousec-fosELISA試劑盒小鼠c-fosELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氧巨大戟萜醇 HPLC≥98% 20mg
MouseCholecystokinin,CCKELISA試劑盒小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T S羥基,二氧靈芝酸DM HPLC≥98% 5mg
Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基白樺酸 HPLC≥98% 20mg
Chickenβ-lactamaseELISA試劑盒雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雙氯芬酸鈉 Diclofenac 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
載玻片細(xì)胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 雙氯芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Diclofenac 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseEotaxin1ELISAKit小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 加巴噴丁 Gabapentin 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,USP30
小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 加巴噴?。?biāo)準(zhǔn)品) Gabapentin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Rat cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 多潘立酮 Domperidone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP5.0
Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 多潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Domperidone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
ChikenPullorumDiseaes,PDELISA試劑盒雞白痢抗體檢測(PD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯硝柳胺 Niclosamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
載玻片細(xì)胞蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒-LEPTIN10/20 氯硝柳胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Niclosamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 環(huán)丙沙星 Ciprofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA試劑盒 ,英文名: gp130/CD130 ELISA Kit 環(huán)丙沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Ciprofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞直銷RNA聚烯酰胺凝膠電泳試劑盒10 羥基脫氫硝苯地平羧酸鹽 Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RNA酶溶液(RNA酶保護分析)50毫升 羥基鐵屎米酮 HPLC≥98% 20mg
RNA清除試劑盒100 羥基鐵屎米酮 HPLC≥95% 20mg
RNA探針聚合酶標(biāo)記試劑盒10 羥基鐵屎米酮 HPLC≥95% 20mg
RNA探針同位素([α32P]CTP)聚合酶標(biāo)記試劑盒20 羥基藤黃酸 HPLC≥95% 20mg
RNA樣品儲存液50毫升 羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸 Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RNA樣品儲存液50毫升 羥基特比萘芬 Hydroxy Terbinafine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RNA熒光(RiboGreen)定量檢測試劑盒20 羥基松香酸 HPLC≥98% 5mg
RNA熒光(RiboGreen)定量檢測試劑盒20 羥基松香酸 HPLC≥98% 5mg
RPE蛋白標(biāo)記試劑盒(不含RPE)3(1毫克/) 羥基三尖杉堿 HPLC≥98% 5mg
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。