收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
人尿道上皮細(xì)胞【Human Ureter: Normal Lliac Artery Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人尿道上皮細(xì)胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963746 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA檢測試劑盒Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3 96T/48T 靈芝烯酸C Ganoderenic acid C 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA檢測試劑盒Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMR 96T/48T 生物胞素 Biocytin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA檢測試劑盒HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1 96T/48T PU-H71 PUH71 質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑
人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA檢測試劑盒Humancardiacisoformofopni,c 96T/48T 乳清酸 Orotic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR
人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4,48T/96T人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4,48T/96T規(guī)格:48T/96T 氟尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Niflumic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA檢測試劑盒Humanheafattyacidbindingprotein,h-FABP 96T/48T 木聚糖 XYLAN 質(zhì)量規(guī)格:>95%,來源于玉米芯,溶于水
人型肝炎IgG(HCV-IgG)試劑盒 Human Hepatitis C virus IgG,HCV-IgG ELISA Kit 阿特拉津,莠去津 Atrazine 質(zhì)量規(guī)格:>97%
人型肝炎IgM(HCV-IgM)試劑盒 Human Hepatitis C virus IgM,HCV-IgM ELISA Kit 丁苯羥酸 Bufexamac 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)試劑盒 Human Hepatitis C Virus (HCV) Core Aigen,HCV core Ag ELISA kit 3-甘油酸激酶 3-Phosphoglyceric Phosphokinase 質(zhì)量規(guī)格:1000u/mg,Sigma分裝
人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA檢測試劑盒Humahymus-leukemiaaigen,TLa 96T/48T 1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖 d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP 質(zhì)量規(guī)格:90.0%,Sigma
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)原人參二醇 HPLC≥98% 20mg
小鼠唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素3(SIGLEC3)ELISA試劑盒 ,英文名: SIGLEC3 ELISA Kit 阿卡波糖 Acarbose 質(zhì)量規(guī)格:>97%,細(xì)胞培養(yǎng)級
兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒RabbitFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T 阿卡波糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Acarbose 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品
牛乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 Bovine lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit 阿昔洛韋,無環(huán)鳥苷 Acyclovir 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
英文名稱humanPGD2-MOXELISAKIT人甲肟-前列腺素D2(PGD2-MOX)規(guī)格:96T/48T 阿昔洛韋,無環(huán)鳥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Acyclovir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動物肝細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒5 腺苷;腺嘌呤核苷 Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級
Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 腺嘌呤核苷(腺苷)(標(biāo)準(zhǔn)品) Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TOP2 ELISA Kit 鹽酸阿地芬寧 Adiphenine HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測試劑盒RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T 鹽酸阿地芬寧(標(biāo)準(zhǔn)品) Adiphenine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
牛乳過氧化物酶(LPO)試劑盒 Bovine lactoperoxidase,LPO ELISA kit 醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林 Alarelin Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人尿道上皮細(xì)胞價格RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosuvastatin Calcium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣 Rosuvastatin Calcium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞舒伐他汀/羅蘇伐他汀游離酸 Rosuvastatin 質(zhì)量規(guī)格:>97%,游離酸
Ratmaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞氏色素 Wright's stain 質(zhì)量規(guī)格:BS
Ratmaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞枯靈 HPLC≥98% 20mg
Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞加德松 Regadenoson 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品) Repaglinide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞格列奈 HPLC≥99% 100mg
Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞格列奈 Repaglinide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ratmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞格非尼 Regorafenib(BAY 73-4506) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,多激酶抑制劑