參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒
貨號(hào):CP97266
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

以下是轉(zhuǎn)基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- FH antibody資源名稱茄科羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia│solanacearum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

anti- FH antibody資源名稱加氏乳桿菌種屬:Lactobacillus gasseri提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，微好氧

anti- FHIT antibody資源名稱唾液乳桿菌種屬:Lactobacillus salivarius提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，厭氧

anti- FHIT antibody資源名稱多形擬桿菌種屬:Bacteroides thetaiotaomicron分離基物:人臉提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；與柳杉花粉熱有關(guān)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PYG培養(yǎng)基:多胨 5.0 g,胰胨 5.0 g,酵母提取物 10.0 g,葡萄糖 10.0 g,鹽溶液 40.0 ml,蒸餾水 960 ml,瓊脂 10.0 g,pH 7.2 ,鹽溶液： ,CaCl 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.4 g,K2HPO4 1.0 g,KH2PO4 1.0 g,NaHCO3 10.0 g,NaCl 12.0 g,蒸餾水 1.0 L 哥倫比亞血平板

anti- FHL1 antibody資源名稱格利菲斯瓦爾德鎮(zhèn)磁螺菌種屬:Magnetospirillum│gryphiswaldense分離基物:river sediment提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:932

anti- Fhl1 antibody資源名稱魯氏少根根霉種屬:Rhizopus arrhizus var. rouxii分離基物:酒曲提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:接合菌門真菌，產(chǎn)糖化酶 生產(chǎn)根霉酒曲培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。

anti- FHL2 antibody資源名稱產(chǎn)黑普雷沃氏菌種屬:Prevotella│melaninogenica分離基物:唾液提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:860生長條件:37℃

anti- FHL3 antibody資源名稱中華石花菌種屬:Mycogelidium│sinense分離基物:子實(shí)體組織提供形式:斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17

anti- FHL5 antibody資源名稱紅色毛癬菌種屬:Trichophyton rubrum安全等級(jí):1模式菌株:未知培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧

anti- FIBA antibody資源名稱乳酸桿菌種屬:Lactobacillus│分離基物:健康孕婦分泌物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:37℃

anti- FIBCD1 antibody資源名稱假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌（暫無）種屬:Bacillus pseudofirmus提供形式:凍干物/斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:堿性彈性蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:成分：大豆蛋白胨 5.0 g，酵母提取物 5.0 g，葡萄糖 10.0 g，K2HPO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 0.2 g，NaCl 5.0 g，Na2CO3(單獨(dú)滅菌）10.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾水 1.0 L。121℃，15分鐘滅菌。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。

anti- FIBP antibody資源名稱戴氏菌種屬:Dyella│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:土壤微生物學(xué)研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:451

anti- fibrillin 2-Specific antibody資源名稱百日咳鮑特菌種屬:Bordetella pertussis提供形式:凍干粉安全等級(jí):2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長條件:37℃，好氧，48h

anti- Fibrinogen beta chain antibody資源名稱致病性大腸埃希菌種屬:Escherichia│coli提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法

anti- Fibrinogen gamma chain antibody資源名稱熱纖梭菌種屬:Clostridium thermocellum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:嗜熱嚴(yán)格厭氧纖維素分解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PYC培養(yǎng)基:Casein peptone (tryptic digest) 5.0 g,Peptone 5.0 g,Yeast extract 10.0 g,Cellulose 10.0 g,濾紙條/濾紙漿 適量 ,Distilled water 1.0 L,pH 7.5生長條件:55℃，嚴(yán)格厭氧

anti- Fibrinogen gamma chain antibody資源名稱云芝栓孔菌（斜面）種屬:Trametes versicolor提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:云芝多糖,分解木質(zhì)素, 蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3.0g，七水硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20.0g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧

anti- Fibromodulin antibody資源名稱酸硫桿狀菌種屬:Acidithiobacillus│sp.分離基物:生物除臭塔提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:氧化亞鐵硫桿菌伴生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:24

anti- Fibromodulin antibody資源名稱痢疾志賀菌種屬:Shigella│dysenteriae提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃
轉(zhuǎn)基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒大鼠 GFAP Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 NTS Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

大鼠 NRG2 Human SLC17A5(Sialin) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 NRG1 Human MAGEC1(Melanoma-associated antigen C1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ENA-78 Human HDL(High-density lipoprotein) ELISA Kit46.875ng/ml78.125-5000ng/ml

大鼠 SDH Human PON2(Serum paraoxonase/arylesterase 2) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 PEDF Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit0.141ng/ml0.234-15ng/ml