50T 番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因染料法PCR試劑盒-儀表網(wǎng)

公司介紹主營(yíng)產(chǎn)品

上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域，擁有分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團(tuán)隊(duì)，經(jīng)營(yíng)科研生化試劑、分析試劑、實(shí)驗(yàn)耗材，推出技術(shù)先進(jìn)、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國(guó)乃至于世界各地科研機(jī)構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領(lǐng)域的客戶，提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個(gè)種類產(chǎn)品線，部分產(chǎn)品接受定制服務(wù)！

公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域，全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈！

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介在線詢價(jià)

番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因染料法PCR試劑盒在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，Z后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因染料法PCR試劑盒產(chǎn)品詳情

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因染料法PCR試劑盒
貨號(hào):CP96887
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
?實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶（2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下是番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因染料法PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Guinea pig IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit資源名稱科氏葡萄球菌解脲亞種種屬:Staphylococcuscohniisubsp.urealyticus分離基物:人類皮膚

Guinea pig IL-2(Interleukin 2) ELISA Kit資源名稱頭葡萄球菌解脲亞種種屬:Staphylococcuscapitissubsp.urealyticus分離基物:人體皮膚

Guinea pig IL-4(Interleukin 4) ELISA Kit資源名稱木賊鐮孢種屬:Fusariumequiseti分離基物:花菜籽

Guinea pig MCP-1(Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit資源名稱Amycolatopsisdecaplanina種屬:Amycolatopsisdecaplanina分離基物:土壤

Guinea pig MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit資源名稱Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila種屬:Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila分離基物:土壤

Guinea pig MYO(Myoglobin) ELISA Kit資源名稱棘孢小單胞菌種屬:Micromonosporaechinospora安全等級(jí):1

Guinea pig NGF(Nerve Growth Factor) ELISA Kit資源名稱大孢鏈霉菌種屬:Streptomycesmacrosporus安全等級(jí):1

Guinea pig NOS3/eNOS(Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit資源名稱紫紅鏈霉菌種屬:Streptomycesviolaceoruber分離基物:土壤

Guinea pig OC/BGP(Osteocalcin) ELISA Kit資源名稱法國(guó)蜜環(huán)菌種屬:Armillariella│gallica提供形式:斜面培養(yǎng)物

Guinea pig PCSK9(Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9) ELISA Kit資源名稱中間普氏菌（不提供）種屬:Prevotellaintermedia分離基物:膿胸

Guinea pig PEDF(Pigment Epithelium Derived Factor) ELISA Kit資源名稱綠葉假單胞菌種屬:Pseudomonas│chlororaphis提供形式:凍干物

Guinea pig PIIINP(N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit資源名稱紫芝(紫靈芝，中華靈芝)種屬:Ganoderma│sinense提供形式:斜面培養(yǎng)物

Guinea pig PIINP(Procollagen II N-Terminal ProPeptide) ELISA Kit資源名稱變色栓菌（云芝）（斜面）種屬:Trametes versicolor提供形式:斜面培養(yǎng)物

Guinea pig RANTES(Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed And Secreted) ELISA Kit資源名稱頭狀葡萄球菌頭狀亞種種屬:Staphylococcus│capitis subsp. capitis提供形式:凍干物

Guinea pig TIMP-1(Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit資源名稱Z小弧菌種屬:Vibrio mimicus提供形式:凍干物

Guinea pig TIMP-2(Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit資源名稱腸沙門氏菌腸亞種傷寒血清型種屬:Salmonella│enterica subsp. enterica serovar Typhi提供形式:凍干物

Guinea pig TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit資源名稱鴨沙門氏菌種屬:Salmonella anatum提供形式:凍干物

Guinea pig TGF-β1(Transforming Growth Factor Beta 1) ELISA Kit資源名稱嗜鞣管囊酵母種屬:Pachysolen tannophilus提供形式:凍干物，斜面

Guinea pig VEGF-A(Vascular Endothelial cell Growth Factor A) ELISA Kit資源名稱志賀毒性大腸埃希氏菌種屬:Escherichia coli STEC分離基物:腹瀉病例糞便標(biāo)本

IFN-γ|IFNG|IFG|IFI|Type II Interferon哥倫比亞血平板產(chǎn)品用途：哥倫比亞血平板用于一般病原菌的分離培養(yǎng)和溶血性細(xì)菌的鑒別。產(chǎn)品規(guī)格：90mmX20個(gè)冷藏：2-8℃

Immunoglobulin E巧克力平板培養(yǎng)基(普通)產(chǎn)品用途：巧克力平板培養(yǎng)基(普通)用于分離奈瑟氏菌、流感嗜血菌等。產(chǎn)品規(guī)格：90mmX20個(gè)冷藏：2-8℃

IgG(Immunoglobulin G)巧克力平板培養(yǎng)基（單抗）產(chǎn)品用途：添加萬古霉素，用于分離奈瑟氏菌、流感嗜血菌等。產(chǎn)品規(guī)格：90mmX20個(gè)冷藏：2-8℃

IL-10|IL10|IL10A|CSIF|TGIF沙氏瓊脂平板產(chǎn)品用途：沙氏瓊脂平板用于真菌的分離培養(yǎng)，還用于一次性使用衛(wèi)生用品真菌菌落總數(shù)檢測(cè)。(GB)產(chǎn)品規(guī)格：90mmX20個(gè)冷藏：2-8℃

IL-6(Interleukin 6)|IL6|BSF2|HGF|HSF|IFNB2|CDF營(yíng)養(yǎng)肉湯產(chǎn)品用途：營(yíng)養(yǎng)肉湯用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等，也可用于消毒效果測(cè)定。(GB)產(chǎn)品規(guī)格：10mlX20支冷藏：2-8℃

IL-8|IL8|CXCL8|GCP-1|GCP1|LECT|LUCT|LYNAP|MDNCF|MONAP|NAF|NAP-1|NAP1|3-10C|AMCF-I|K60營(yíng)養(yǎng)瓊脂（斜面）用途：營(yíng)養(yǎng)瓊脂（斜面）用于普通菌種的保存。（GB、ISO)產(chǎn)品規(guī)格：20支/盒冷藏：2-8℃

KIM-1|HAVCR1|HAVCR|HAVCR-1|KIM-1|KIM1|TIM|TIM-1|TIM1|TIMD-1|TIMD1雙糖鐵斜面產(chǎn)品用途：雙糖鐵斜面用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖，及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。(GB)產(chǎn)品規(guī)格：20支/盒冷藏：2-8℃

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產(chǎn)品名稱	參考價(jià)	地區(qū)	公司名稱	更新時(shí)間
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種植體手動(dòng)扭矩器械試驗(yàn)儀--裝置4型優(yōu)質(zhì)	￥35000	菏澤市	山東賽銳特檢測(cè)儀器有限公司	2025-01-11	在線詢價(jià)
液壓快換接頭連接器插拔泄漏測(cè)試儀簡(jiǎn)單	￥10000	上海市	上?；諠詣?dòng)化設(shè)備有限公司	2024-12-20	在線詢價(jià)

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