我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
人支氣管上皮細(xì)胞直銷 | T25m2 | CS-963713 |
人支氣管上皮細(xì)胞【Human Lung: Bronchial Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)試劑盒 Rat ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 去離子甲酰胺 Formamide deionized 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒 Rat ansforming Growth Factor β1,TGF-β1 ELISA kit 石蠟油 Paraffin oil, light fraction 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí),PCR Grade
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1受體(TGF-β1R)試劑盒 Rat ansforming Growth factor β1 receptor,TGF-β1R ELISA kit 乙酸鉀 Potassium acetate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)試劑盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit 無(wú)水乙酸鈉 acetate, anhydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2受體(TGF-β2R)試劑盒 Rat ansforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit 低熔點(diǎn)瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖 Agarose, low gelling temperature 質(zhì)量規(guī)格:BR;具有低凝膠溫度
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)試劑盒 Rat ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA Kit 無(wú)水二氫鉀 Potassium phosphate, monobasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)試劑盒 Rat ansforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit 6-芐氨基嘌呤 6-Benzylamino purine 質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)試劑盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit 水(HPLC grade) Water 質(zhì)量規(guī)格:HPLC grade
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratansferrieceptor,TFR 96T/48T 馬來(lái)酸,順丁烯二酸 Maleic acid 質(zhì)量規(guī)格:AR,HPLC>99%
大鼠轉(zhuǎn)移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)試劑盒 Rat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit 硫酸銨 Ammonium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISA試劑盒大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小連翹堿,角茴香酮堿 HPLC≥95% 20mg
小鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(W3A)ELISA試劑盒 ,英文名: W3A ELISA Kit 異阿魏酸乙酯 HPLC≥95% 20mg
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T 乙酰甲基二氫兩面針堿 HPLC≥95% 20mg
牛腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)試劑盒 Bovine Adenovirus 3(ADV3)aibody IgG ELISA kit 蛇葡萄素F HPLC≥95% 20mg
英文名稱humanAbELISAKIT人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T 苦參醇W HPLC≥95% 20mg
地生蘭(terresial)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 苦參醇M HPLC≥95% 20mg
Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苦參醇B HPLC≥95% 20mg
小鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B(W10B)ELISA試劑盒 ,英文名: W10B ELISA Kit 鶴慶五味子辛素 HPLC≥95% 20mg
兔子B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T 黨參炔醇 HPLC≥95% 20mg
牛纖維蛋白原(Fb)試劑盒 Bovine Fibrinogen,Fb Elisa Kit 黃芩素 O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
人支氣管上皮細(xì)胞直銷RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石吊蘭甲素 HPLC≥98% 20mg
RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石當(dāng)歸素 HPLC≥98% 20mg
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISAKit大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Lithocholic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>97(GC),標(biāo)準(zhǔn)品
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISA試劑盒大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一烯酸鋅 Zinc undecylenate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
RatFibronectin,FNELISAKit大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一烯酸 GC≥98% 500mg
RatFibronectin,FNELISA試劑盒大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Undecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)
RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC)) Undecane 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)
RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA試劑盒大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl undecanoate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一酸甲酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC)) Methyl undecanoate 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GCS,≥99.0%(GC)
RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISA試劑盒大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 十一酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Testosterone undecanoate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定