細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
小鼠腎動脈平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細胞 | GOY-01X0917 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠腎動脈平滑肌細胞
2.組織來源:腎動脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠腎動脈平滑肌細胞分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內,上行至皮質與髓質交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網(wǎng):腎小球毛細血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸。腎動脈平滑肌細胞是腎動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
5.方法簡介:
()實驗室分離的小鼠腎動脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
()實驗室分離的小鼠腎動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號CM-M061
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細胞形態(tài)成纖維細胞樣
傳代特性可傳3代左右
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 預熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得最佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
50次 動植物膜蛋白微量制備試劑盒 Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit 常溫保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Alpha-1A adrenergic receptor
2 ug pSIM5 pSIM5 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Oxytocin
25次 一站式真菌mRNAout One-Stop Fungal mRNA Isolation Kit 4℃保存
小鼠腎動脈平滑肌細胞MAGED1 黑色素瘤相關抗原D1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDO1 半雙加氧1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-APP/ABPP(Ser198) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 規(guī)格: 0.2ml
Adenylate kinase 2/AK2 苷酸激1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉蛋白家族1抗體 規(guī)格: 0.1ml
50T 輪狀病毒A組PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
20次 克必隆零背景T載體 Zero Background T Vector 低溫保存
2 ug p3×FLAG-CMV-14 p3×FLAG-CMV-14 低溫運輸,-20℃保存
250mL 非凍型細菌RNA保存液 Bacterial RNALOCKER 常溫
phospho-PRL(Ser163) 磷酸化泌素抗體 規(guī)格: 0.1ml
2 ug pOJ260 pOJ260 低溫運輸,-20℃保存