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細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實(shí)驗(yàn)方法

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細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實(shí)驗(yàn)方法IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

大鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

ANGPTL4 Others Human ANGPTL4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

AE-1雜交瘤細(xì)胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清

神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

Hce-8693(人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)) 5×106cells/瓶×2 球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基OsM

細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C

CMA1 Others Human CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

草魚腎細(xì)胞;GIK

T24細(xì)胞,膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 子宮高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
DNASE1 Others Human DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]

CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Mv1Lu細(xì)胞,貂肺上皮細(xì)胞 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞,HEL細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4

鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16

NBL1 Others Human DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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