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更新時(shí)間:2017-07-10 12:29:09瀏覽次數(shù):393次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T售后服務(wù)NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
MOLT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 MOLT-4 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC
總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37
CNTN3 Others Rat 大鼠 Contactin 3 / CNTN3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人肺泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
M14細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 枯草芽孢桿菌黑色變種 人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427]
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
L1210(小鼠白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物HDF-f L
人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株 Human
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(GM1)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human anti-ganglioside(GM1)antibody IgM ELISA Kit
MousehepatitisBviruseantibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase1(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
HumanMetallothionein,MISA試劑盒人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanplaetantibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人游離蛋白S(FP-S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Major histocompatibility complex class II (MHC II /HLA- II) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒
Humanfetalsulfoslycoproteinantigen,FSAELISAKit 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterferonα,IFN-αELISA試劑盒人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人*11(KLK11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T售后服務(wù)大鼠白介素18(IL-18)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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