當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說明書
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更新時間:2017-07-10 12:25:40瀏覽次數(shù):357次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BPI Others Human 人 BPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CHO/dhFr-倉鼠卵巢細(xì)胞,二氫*還原酶缺陷 CHO/dhFr- Chinese hamster ovary cells, dihydrofolate reductase deficiency IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
CTLL-2(小鼠T細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF
狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;DH82
COL4A3 Others Rat 大鼠 COL4A3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
皮下脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Hut-102細(xì)胞,人T淋巴瘤細(xì)胞系 Walker氏癌肉瘤256瘤株,W256細(xì)胞 人小氣道上皮細(xì)胞裂解物HSAEpiCL
NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0070CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f
大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人淋巴成纖維細(xì)胞HLF
小鼠胱天蛋白酶11(P11)ELISA試劑盒 ,英文名: P11 ELISA Kit
人神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2ELISA檢測試劑盒HumanNeuronalChemorepellentSlit2ELISAKit 96T/48T
大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit
英文名稱RatSomatostatinELISAKit大鼠*(SS)規(guī)格:96T/48T
環(huán)境鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitABP人雄激素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T
人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat histamine (HIS) ELISA Kit 大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒
HumanHomovanillicacid,HVAELISAKit 人高香草酸(HVA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humaninterferonactivatedgene205,Ifi205ELISA試劑盒人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit人角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說明書大鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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