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更新時間:2017-07-10 12:28:39瀏覽次數(shù):356次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網雙縮脲蛋白定量試劑盒1000T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
雙縮脲蛋白定量試劑盒1000T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
雙縮脲蛋白定量試劑盒1000T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白
大鼠子宮頸上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人細胞裂解液 (陽性對照)
Reh人急性非B非T淋巴細胞白血病 Reh human acute non B non T lymphocytic leukemia IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
原代神經膠質細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
Dami(人巨核細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質成纖維細胞HVMF
肝內膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CNTN5 Others Mouse 小鼠 Contactin 5 / CNTN5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人結直腸腺癌細胞;LoVo
NCI-295R細胞,人腎上腺皮質腺癌細胞 小鼠艾氏腹水瘤細胞TCM15,S180細胞 CL-0226SW626(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2
WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2
HMC-c 人冠狀動脈平滑肌細胞(HMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細胞-裂解物HDF-a L
人腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0]
HepG2/2-15細胞,人肝癌細胞 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞,RAW 264.7細胞 大耳山羊皮膚細胞;LDG-3
MCF-7(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內皮細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml
大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 ,英文名: i-PTH ELISA Kit
人神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA檢測試劑盒Humanfractalkine/neurotactinELISAKit 96T/48T
植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[鐵],葉綠體(SODB)免疫試劑盒 Plant(Mouse-ear cress)superoxide dismutase [Fe],chloroplastic(SODB)ELISA kit
CLIAKitforphytohaemagglutinin,PHAELISAKit植物血凝素規(guī)格:48T/96T
食物阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCholicacid人膽酸規(guī)格:48T/96T
人游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human major histocompatibility complex class I (MHC I and /HLA I) ELISA Kit 人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒
Humantargetedribonuclease,TRELISAKit 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanInterferoninducibleT-cellChemoattractant,I-TACELISA試劑盒人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織結構型內皮細胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humankeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit人角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙縮脲蛋白定量試劑盒1000T免費代測大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素20(IL-20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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