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更新時間:2017-07-10 12:32:15瀏覽次數(shù):466次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白
大鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
CD1B Others Human 人 CD1B / CD1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
H9c2(2-1)大鼠心肌細胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S
視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎小管上皮細胞MREpiC
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20
CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人細胞裂解液 (陽性對照)
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
HME4細胞,人黑色素瘤細胞 青春雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0905
UACC-812(人導管瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928
HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細胞cDNAHDMEC cDNA
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22
ZR-75-30細胞,癌細胞 人食管癌細胞,TE-11細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒 Human neuregulin-4,NRG4 ELISA kit
MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISA試劑盒人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human transforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanInterleukin10,IL-10ELISA試劑盒人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20次
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TNF-B酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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