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白細(xì)胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 12:31:40瀏覽次數(shù):249次

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白細(xì)胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實驗方法IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IZUMO4 Others Human IZUMO4 / C19orf36 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 Alveolar macrophages of NR8383 rats F12K培養(yǎng)基(SIGMA)+20%FBS

胃癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬細(xì)胞MMa

白細(xì)胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
白細(xì)胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
白細(xì)胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
人小氣道上皮細(xì)胞HSAEpiC

CNTFR Others Rat 大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

豬腎細(xì)胞;PK-15

R 1610細(xì)胞,中國倉鼠體細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 CM-R101大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3

IL4R Others Human IL4R / CD124 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

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人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2C

9204細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞,RBL-2H3細(xì)胞 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1

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小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒 ,英文名: DPP4 ELISA Kit

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大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒 Rat Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit

英文名稱RatHRAbIgGELISAKit大鼠抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格:96T/48T

甲醛RNA電泳上樣緩沖液(RNA酶保護(hù))10毫升

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HumanInterferonαAntibody,IFNα-AbELISA試劑盒人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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