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白細胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
白細胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
白細胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
IGFBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 標簽)
大鼠膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
ERP27 Others Human 人 ERP27 人細胞裂解液 (陽性對照)
HL-60人原髓細胞白血病細胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS
小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
GH3(大鼠垂體瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓神經元MN-dsc
大鼠腎小管上皮細胞RRTEpiC
CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人細胞裂解液 (陽性對照)
散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21
NCI-H1688細胞,人經典小細胞肺癌細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化),PC-12細胞 CM-H135人脈絡膜微血管細胞*培養(yǎng)基100mL
PC-3(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28021 Hematopoietic Progenitor CellExpansion Medium DXF, 造血祖細胞擴展培養(yǎng)基DXF 500ml
CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細胞-新生兒RNAHEF-n miRNA5 μg
盤羊皮膚細胞;OAM-S1
DLD-1細胞,人結直腸腺癌上皮細胞 人視網膜母細胞瘤,Y79細胞 人導管癌細胞;ZR-75-30
HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經激肽B(NKB)免疫試劑盒 Human Neurokinins B,NKB ELISA Kit
MousehepatitisBvirussurfaceantigen,HBsAgELISAKit小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PASE-10蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次
Humanmethotrexate,MTXELISA試劑盒人甲胺喋呤(MTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanplaetfactor3,PF3ELISAKit人血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒
Humancommonacuymphocyticleukaemiaantigen,CALLAELISAKit 人普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISA試劑盒人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*(arginine)含量化學比色法定量檢測試劑盒20次
HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
白細胞蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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