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更新時(shí)間:2017-07-10 12:30:29瀏覽次數(shù):167次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
核蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
核蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PLAT Others Mouse 小鼠 tPA / PLAT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
Daudi人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 Daudi human Burkitt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc
CL-0459U14(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CNTN3 Others Mouse 小鼠 Contactin 3 / CNTN3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EBTr (NBL-4)牛胚氣管細(xì)胞 EBTr (NBL-4) of bovine embryo tracheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細(xì)胞)
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒總RNAHDF-f tRNA
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
VERO E6細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系 Lec1(卵巢細(xì)胞) 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]
EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7
大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒 Human GFAP ELISA Kit
MousehepatitisBvirussurfaceantibody,HBsAbELISAKit小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
HumanMethemoglobin,MHBELISA試劑盒人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanplaetbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人游離β絨毛膜*(f-βhCG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat histone deacetylase (HD) ELISA Kit 大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒
Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAntigen,LTAELISAKit 人非小細(xì)胞肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織結(jié)合(酯化)*酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanKallikrein1,KLK1ELISAKit人*1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
核蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T免費(fèi)代測大鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠艾杜糖酯酶(IDS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司核蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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