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改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)

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改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
FGF9 Protein Human 重組人 FGF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

ASGR2 Others Human ASGR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人心臟成纖維細(xì)胞-心室HCF-av
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞;V79

COL5A2 Others Human COL5A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0045C-33 A(人子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Ski細(xì)胞,人宮頸上皮細(xì)胞癌 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞,CCRF-CEM細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6

BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CPB1 Others Human CPB1 / PCPB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CGB5 Others Human CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

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家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC

二氫*還原酶缺陷型中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞,鼠細(xì)胞系

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse

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