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更新時(shí)間:2017-07-10 12:25:23瀏覽次數(shù):266次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
FGF9 Protein Human 重組人 FGF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人心臟成纖維細(xì)胞-心室HCF-av
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞;V79
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0045C-33 A(人子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Ski細(xì)胞,人宮頸上皮細(xì)胞癌 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞,CCRF-CEM細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CPB1 Others Human 人 CPB1 / PCPB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CGB5 Others Human 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人真皮成纖維母細(xì)胞-HDF-a
家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC
二氫*還原酶缺陷型中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞,鼠細(xì)胞系
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse
SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)免疫試劑盒 Human Nerve growth factor,NGF ELISA kit
Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BAX蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次
HumanmembraneIgM,mIgMELISA試劑盒人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPlasminogen,PlgELISAKit人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat transferrin receptor (TFR/CD71) ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit 人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanintercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISA試劑盒人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織堿性磷酸酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000T售后服務(wù)大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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