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酸性蛋白酶抑制劑1ml免費(fèi)代測(cè)

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酸性蛋白酶抑制劑1ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
酸性蛋白酶抑制劑1ml免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

LAMP1 Others Rat 大鼠 LAMP1 / CD107a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Dami人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 Dami human megakaryocytic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

人視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞HRA

BT-20(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC
CM-H087人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

COLEC12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人食道上皮細(xì)胞HEEpiC

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C 人膀胱癌細(xì)胞,5637細(xì)胞 BEL-7402(肝癌細(xì)胞)

人癌細(xì)胞;MDA-MB-453

GFRA2 Others Human GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EPHB4 Others Human EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)

T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E

CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)免疫試劑盒 Human Neurofilament protein M,NF-M ELISA kit

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

AKT蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5

HumanMelatonin,MISA試劑盒人褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人*(Protamine)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat transforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒

Humansquamouscellcarcinomarelatedantigen,SCCAgELISAKit 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒20

Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit*輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性蛋白酶抑制劑1ml免費(fèi)代測(cè)大鼠叉頭蛋白P3FOXP3ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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