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更新時間:2017-07-10 12:22:41瀏覽次數:163次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Aprotinin 5mg實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Aprotinin 5mg實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Aprotinin 5mg實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白
大鼠肝竇內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細胞裂解液 (陽性對照)
293T/17人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS
人淋巴內皮細胞HLEC
BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纖維母細胞-新生HDF-n
CM-M023小鼠淋巴管內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
CPA2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
97H人肝癌細胞 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS
IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 標簽)
TT(人甲狀腺導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌細胞)
CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胰腺癌細胞;PANC-1
人子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
C127細胞,小鼠細胞 Y1(腎上腺皮質細胞) 人胚肺成纖維細胞;MRC-5
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽)
RKO(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ,英文名: OC ELISA Kit
人神經肽Y(NP-Y)ELISA檢測試劑盒HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit 96T/48T
大鼠酸性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒 Rat acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit
英文名稱RatEpithelialneutrophilactivatingpeptide-78ELISAKit大鼠上皮中性粒細胞活化肽(ENA-78)規(guī)格:96T/48T
環(huán)境無機磷/游離磷酸根離子比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitTI-Ag人胸腺非依賴性抗原規(guī)格:48T/96T
人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒
HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應比色法定量檢測試劑盒20次
HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Aprotinin 5mg實驗方法大鼠促上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促甲狀腺激素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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