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更新時間:2017-07-10 12:22:25瀏覽次數(shù):121次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Leupeptin 5mg免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Leupeptin 5mg免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Leupeptin 5mg免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白
大鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
IGFBP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
Jurkat, Clone E6-1人T淋巴細胞白血病細胞 Jurkat, Clone and E6-1 in human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人胃平滑肌細胞HGSMC
BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細胞-HEK-a
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
BT474 人導管癌細胞
WI-38人胚肺細胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標簽)
人前列腺成纖維細胞(HPrF)(5×105) 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Human
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胰腺癌細胞;AsPC-1
兔骨髓間質(zhì)干細胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells
SF-295細胞,人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞 毛霉 人腸平滑肌細胞RNAHISMC miRNA5 μg
SF126(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HCC827(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;CV-1
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒 ,英文名: AMH ELISA Kit
人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒HumanNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T
鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)免疫試劑盒 Duck neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit
CLIAKitforPAF(Mouseplaetactivatingfactor)ELISAKit小鼠血小板活化因子規(guī)格:48T/96T
水中腸桿菌(E.coli)比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCP人瘢痕性天皰瘡抗體規(guī)格:48T/96T
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tumor associated antigen (TAA) ELISA Kit 人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒
HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)*明膠法比色定量檢測試劑盒20次
HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Leupeptin 5mg免費代測大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促性腺素釋放素受體(GnRHR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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