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更新時間:2017-07-10 12:20:51瀏覽次數(shù):159次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)無去垢劑細胞裂解液100ml售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
無去垢劑細胞裂解液100ml售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白
大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照)
A3人T淋巴細胞白血病細胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人肺成纖維細胞HPF
B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細胞HA
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6
CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人細胞裂解液 (陽性對照)
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細胞
293XL-hTLR7人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR7 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin
NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標簽)
人前列腺平滑肌細胞(HPSMC)(5×105) 細胞名稱 種屬
人肺動脈成纖維細胞 (HPAF)( 5×105 )
人羊膜細胞;WISH
CL-0317AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2
人胃癌細胞;MGC-803 大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基 100mL
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGD2 ELISA Kit
人神經(jīng)細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA檢測試劑盒HumanNeuralcelladhesionmoleculeligand1,NCAM-L1ELISAKit 96T/48T
魚熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒 Fish Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
CLIAKitforPF-4/CXCL4(RabbitPlaetFactor4)ELISAKit兔子血小板因子4規(guī)格:48T/96T
食物糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitFSH人促卵泡素規(guī)格:48T/96T
人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat major histocompatibility complex class II (MHC II /AgB /H-1 II) ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒
HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit 人特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanInsulinReceptorβ,ISR-βELISA試劑盒人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKit人軍團菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無去垢劑細胞裂解液100ml售后服務(wù)大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*7α-羥化酶(CYP7A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(CH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司無去垢劑細胞裂解液100ml售后服務(wù)本著標準*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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